慢性应激与抑郁大鼠海马区糖皮质激素受体表达的相关研究

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目的:本研究建立慢性心理应激大鼠抑郁模型,探讨应激与HPA轴功能紊乱和海马神经元损害在抑郁症发病中的相关机制。观察慢性应激后大鼠行为学改变和肾上腺皮质、海马的病理学变化;检测慢性应激抑郁大鼠海马GR的数目和表达的改变及米非司酮对慢性应激抑郁大鼠GR表达的影响;为阐明应激致抑郁症的病因机制及抗抑郁药物研究的新作用靶点提供依据。方法:采用苏州大学动物实验中心的成年雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(NC)、束缚应激组(MS)、糖皮质激素组(CO),分别用长期束缚制动方法和腹腔注射糖皮质激素建立大鼠应激抑郁模型,建模第2 w末MS组和CO组随机各选半数大鼠分别为束缚+米非司酮组(MS+RU)和激素+米非司酮组(CO+RU),两组均给予米非司酮54 mg/kg.d连续注射7 d,造模21d后,常规固定制作肾上腺、海马HE片;免疫组化GR片,进行相应细胞记数并显微拍照,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠海马区GRmRNA表达的变化,所得数据均输入SPSS13.0进行统计分析。结果:(1)应激抑郁模型大鼠从第2 w起体重、24 h摄食量、1 %蔗糖水消耗百分比、旷场试验行为学评分均明显低于NC组(P<0.01),提示两组应激模型在21d成功建立。(2)MS组和CO组肾上腺皮质明显增厚,束状带细胞增生肥大,提示HPA轴功能紊乱。(3)MS组和CO组海马各区神经细胞不同程度的丢失,CA3区最明显,CA1、CA2区次之,DG丢失最少。(4)MS组和CO组海马各区GR阳性细胞数量明显低于NC组(P<0.01)。(5) MS组和CO组海马组织GRmRNA表达较NC组明显降低(P<0.01)。(6) MS+RU组和CO+RU组大鼠体重、1 %蔗糖水消耗百分比、行为学评分分别与MS组和CO组比较,均有明显升高(P<0.01)。(7) MS+RU组和CO+RU组海马各区GR阳性细胞数量分别与MS组和CO组比较有明显升高(P<0.01)。(8) MS+RU组和CO+RU组海马组织GRmRNA表达分别与MS组和CO组比较有明显升高(P<0.01)。结论:采用慢性心理应激束缚制动方法和生物应激注射氢化可的松方法成功建立应激抑郁大鼠模型;慢性应激抑郁大鼠肾上腺皮质功能紊乱,海马各区神经元不同程度受损,CA3区最明显;海马组织的GR数目和GRmRNA表达下调与心理应激介导的抑郁症的发病显著相关;米非司酮可提高GR数目和GRmRNA表达,可能在应激诱发抑郁症的治疗中发挥重要作用。
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