安心注射液提取工艺优化与质量标准初步研究

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目的:通过不同现代中药提取方法的研究比较,选出安心生物碱注射液合理、先进的制备工艺和建立以高效液相色谱测定为基础的稳定可靠的质量控制标准。为开发新型具有抗心肌缺血或心血管保护作用的临床用药奠定基础。 方法:采用平行设计法,以总生物碱提取量为判断指标,分别观察超声、回流、浸渍法对益母草和茺蔚子中生物碱的提取率,并比较70%乙醇、95%乙醇、盐酸乙醇、盐酸、磷酸等不同溶剂对三种提取法的影响。在各组中分别筛选出提取率高的土艺,设计正交实验,进一步比较各方法的提取效果,确定最佳的提取工艺。 以生物碱含量为判断指标,采用四种不同化学特性的ADS树脂,分别观察其在提取液不同PH环境,不同洗脱条件下,回收目的生物碱的量和纯度,确定最佳纯化工艺。 以硅胶G薄层层析检测盐酸水苏碱作为样品生物碱的定性分析;以Waters-NH4色谱柱(250mmX4.6mm Sam),流动相为乙睛-水(80:20),检测波长215nm,为基本色谱条件,HPLC检测盐酸水苏碱为样品生物碱的定量指标;建立安心注射液的质量标准体系。 结果:超声结合不同溶剂提取对安心生物碱提取率的影响不同,溶剂C的平均生物碱提取率为0.373%。在超声法中,以溶剂C的提取干膏生物碱含量和提取率最高。在回流法中,最佳的为溶剂C的平均生物碱提取率为0.317%。在冷浸法中,以溶剂A的提取干膏生物碱含量和提取率最佳,平均生物碱提取率为0.410%。进一步的通过正交实验确定最佳提取方法为冷浸法结合A溶剂提取,工艺为A283C3D3。在纯化工艺方面,在提取液的pH为6-8之间时,四种ADS大孔树脂对生物碱均有吸附作用。其中pH为8时ADS-B的静态吸附最强;经1%盐酸-30%乙醇洗脱下,ADS-B的回收生物碱的量略低于ADS-C,但回收物干膏的生物碱(以水苏碱含量为判断指标)已达38.6%,符合国家中药新药技术要求。 通过对10批放大量试验样本的检测,发现以硅胶G薄层层析检测盐酸水苏碱对样品生物碱的定性分析,重复性,操作简易;以Waters-NH4色谱柱(250minX4.6mm Sam),流动相为乙睛-水(80:20),检测波长215nm,为基本色谱条件的HPLC检测定量方法,检测精度高,重复性好。10批放大量试验样本的安心生物碱提取物,经薄层层析和HPLC检测,各样本的水苏碱含量变异小,提取率高,提示:本研究建立的提取纯化工艺稳定性强。 结论:1、本研究建立起以溶剂A冷浸法A283C3D3为工艺的高效和稳定的安心生物碱提取工艺。 2、确立了以ADS-B树脂吸附分离技术的高效和稳定的安心生物碱纯化工艺。 3、初步建立了以硅胶G薄层层析定性,HPLC检测样品中盐酸水苏碱为定量指标的安心注射液的质量标准体系。为进一步开发安心注射液为新型具有抗心肌缺血或心血管保护作用的新药奠定了基础。
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