线粒体靶向性肽Ss-31对人眼小梁细胞抗氧化应激的实验研究

来源 :四川医科大学 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aorong
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目的:研究线粒体靶向性肽SS-31对过氧化氢(H2O2)处理的人眼小梁细胞(Human Trabecular Meshwork Cells,HTMCs)氧化应激损伤的保护作用及可能的机制,为青光眼的药物治疗及预防提供实验依据。  方法:将永生化的小梁细胞(深圳眼科医院刘旭阳教授惠赠)进行培养传代后随机分为5组。正常组:正常培养的HTMCs;对照组(H2O2处理组):正常培养的HTMCs+过氧化氢(100 umol/L,处理24h);实验组(SS-31预处理组):正常培养的HTMCs+SS-31(SS-31浓度分别为10 nM、100 nM、1μM,处理2h)+过氧化氢(100 umol/L,处理24h)。应用MTT法检测各组细胞的存活率,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,采用DCFH-DA探针检测细胞内的ROS,ELISA检测细胞色素C(cytochrome C,CytC)的释放,PT-PCR检测caspase-3 mRNA的表达水平。  结果:1.与对照组相比,各个SS-31预处理组小梁网细胞的凋亡率均降低,细胞内ROS生成减少,CytC释放均减少,caspase-3 mRNA表达水平均减少,结果有统计学意义(P<0.05)。2.不同浓度的SS-31组间随SS-31浓度增加,细胞凋亡率降低,细胞内ROS产生减少,CytC释放减少,caspase-3 mRNA表达水平降低,各组间差异存在统计学意义(P<0.05)。3.与正常组相比,各SS-31组细胞凋亡率、细胞内ROS生成、CytC释放、caspase-3 mRNA表达水平均具有统计学意义(P<0.05)。  结论:研究结果发现SS-31可以降低人眼小梁细胞降低细胞凋亡率,使细胞内ROS减少,减少CytC的释放,caspase-3 mRNA的表达水平,有较强的抗氧化应激能力,并在一定浓度范围内,随着SS-31的浓度增加其抗氧化应激能力逐渐增强,SS-31在青光眼的药物治疗作用及机制值得进一步研究。
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