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目的:使用海藻酸(Kainic acid,KA)诱导C57BL/6小鼠产生癫痫样发作以模拟人类颞叶癫痫的发作状态,通过基因芯片方法筛选出异常表达的长链非编码RNA(lncRNA)。选择并探讨其中一个lincRNA-AK035610及其靶基因INHBA在癫痫发病中的参与及调控机制,从而为癫痫的诊断和药物研发提供新的思路及生物学靶点。方法:使用6-8周C57BL/6雄性小鼠,通过腹腔注射海藻酸构建癫痫发作小鼠模型,分离癫痫发作小鼠和对照小鼠的海马,提取RNA后使用长链非编码RNA基因芯片进行分析,对癫痫小鼠中发生异常表达的lncRNA,特别是位于基因之间的LincRNA进行筛选和聚类分析。通过实时荧光定量PCR的生物学方法进行验证表达。针对其中一个lncRNA,lincRNA-AK035610及其靶基因Inhba,进一步在细胞模型和癫痫病人组织中进行验证。使用INHBA重组蛋白处理神经元细胞以及给予小鼠侧脑室注射,证明其保护作用。结果:1.海藻酸可以诱导小鼠产生癫痫样发作,行为发作的同时可以检测到相应的异常脑电。基因芯片分析筛选出13条异常表达的lincRNA,通过实时荧光定量PCR验证lincRNA-AK035610及lincRNA-AK015830具有明显异常表达。选取lincRNA-AK035610为主要研究对象进一步开展研究。生物信息学分析显示AK035610位于INHBA基因下游。我们研究结果发现:1.在癫痫发作小鼠模型海马组织中lincRNA-AK035610及Inhba表达均明显上调,在小鼠皮层组织中,lincRNA-AK035610也有明显上升趋势,但是未观察到明显统计学差异,而INHBA基因在小鼠皮层组织中也呈明显升高。2.在人群中lincRNA-AK035610的同源位点被认为是INHBA基因的splicing variant 1的3’ UTR的一部分。但是在对照组病人中lincRNA-AK035610同源位点的表达和INHBACDS的表达之间没有明显相关性,而在癫痫组病人的脑组织中具有很好的相关性,提示癫痫病人中INHBA的表达以splicing variant1为主要形式;3.lincRNA-AK035610在神经元细胞的亚细胞定位在细胞核内;4.重组INHBA蛋白可以抑制海藻酸诱导的凋亡,并且可以抑制NMDA受体的NR2B亚基的表达,从而对神经元起到保护作用;5.侧脑室注射重组INHBA蛋白可以降低海藻酸诱导的小鼠癫痫发作的行为学等级,同时可以减少小鼠的异常脑电并延长海藻酸诱导的癫痫发作的潜伏期。结论:在小鼠癫痫发作模型中及颞叶癫痫患者手术标本中,lincRNA-AK035610及及靶基因Inhba均明显升高,并且只在癫痫患者手术标本中呈相关性,而在非癫痫病人中无明显相关,提示INHBA表达的改变可以作为癫痫诊断的生物学标记,并且重组INHBA可以缓解癫痫症状并对神经元起到保护作用,可能成为潜在的新的癫痫治疗药物。