【摘 要】
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目的研究不同浓度蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,Bor)单用和联合柔红霉素(DNR)对HL-60细胞凋亡作用,旨在探讨其诱导该细胞凋亡的可能作用机制,以及Survivin mRNA表达的
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目的研究不同浓度蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,Bor)单用和联合柔红霉素(DNR)对HL-60细胞凋亡作用,旨在探讨其诱导该细胞凋亡的可能作用机制,以及Survivin mRNA表达的影响。方法将不同浓度Bor、DNR及两药联合组和对照组作用于HL-60细胞,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法测定细胞在24小时、48小时、72小时增殖活性,并选择对细胞作用最强时间段进行流式细胞术检测细胞凋亡、RT-PCR检测Survivin mRNA表达。结果1.MTT结果:5nmol/lBor作用24小时对HL-60细胞有增殖抑制作用,并诱导其凋亡。随着浓度增加及作用时间的延长可使细胞凋亡率明显增加,10nmol/lBor与1.0umol/lDNR联合作用72小时细胞凋亡率最高,与同剂量两药单独作用相比有显著的差异(P＜0.01)。2.流式细胞术检测表明,各浓度组经72小时培养后均可见细胞凋亡,与对照组相比有显著的统计学意义(P＜0.01),以10nmol/lBor与1.0umol/lDNR联合作用细胞凋亡率最高,达45.84%,较同剂量两药单独作用有显著的差异(P＜0.01)。3.RT-PCR检测结果表明:随着药物浓度的增加,Survivin mRNA的表达逐渐下降,且两药单独作用与联合组之间存在交互作用,以10nmol/lBor与1.0umol/lDNR联合作用72小时Survivin mRNA表达最低。结论Bor能显著抑制HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡,Bor联合DNR对HL-60细胞有协同作用,并能显著下调Survivin基因的表达,这可能是促使HL-60细胞凋亡的机制之一。
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