放射性碘标记Annexin V进行体内凋亡显像的研究

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[目的]①利用放射性碘标记由南京大学医药生物技术国家重点实验室以基因工程技术构建出的AnnexinV重组体。研究该显像剂在S180肉瘤小鼠模型体内分布和药代动力学参数,探索*I-AnnexinV用于体内细胞凋亡显像的可行性。②初步探讨放射性碘标记的AnnexinV和99Tcm-MIBI双核素显像在测定肿瘤细胞凋亡中的应用价值。③采用125I作为示踪剂,估算人体内123I-AnnexinV的辐射吸收剂量,以此来评价它的安全性。[方法]①用125I标记AnnexinV。②制备45个S180肉瘤小鼠模型,每只小鼠尾静脉注射37MBq/kg的125I-AnnexinV,分别在注射后0min、5min、10min、30min、1h、3h、6h、10h、24h颈动脉放血处死各组动物,取出小鼠心、肺、肾等各脏器并测量放射性计数,用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。③一组荷瘤鼠用环磷酰胺诱导S180肉瘤细胞凋亡,另一组注射0.9%生理盐水,作为对照。④采用凋亡显像剂*I-AnnexinV对环磷酰胺组进行SPECT显像,通过划感兴趣区技术计算T/M值(肿瘤与对侧肌肉放射性计数比值)。同时采用凋亡显像剂*I-AnnexinV和肿瘤显像剂99Tcm-MIBI(99Tcm-2-甲基异丁基异腈)对荷S180肉瘤小鼠进行双核素SPECT显像。⑤显像结束后即刻颈动脉放血处死小鼠,取出肿瘤瘤体,用免疫组化法分别测定肿瘤组织的bcl-2和Caspase-3的表达水平。⑥用125I- AnnexinV作为示踪剂,测定放射性碘标记的AnnexinV在小鼠体内各脏器放射性分布并换算至标准人体内分布数据。按照医学内照射吸收剂量(MIRD)方法将其输入Mirdose-3软件,估算人体内123I-AnnexinV和131I-AnnexinV的辐射吸收剂量。[结果]①体内分布实验表明肝脏和肾脏是摄取*I-AnnexinV的主要脏器,各脏器中的放射性计数随着时间的延长逐渐降低, T/NT(单位质量肿瘤组织的放射性计数/单位质量非肿瘤组织的放射性计数)随着时间的延长缓慢增加,且在610h达到峰值;
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