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目的:本课题旨在研究老年痴呆模型小鼠脑内氧化应激相关的自噬信号通路的变化,并探讨三七总皂苷在AD模型小鼠中调节氧化应激-线粒体自噬治疗AD的机制。方法:非老化的SAMR1小鼠作为正常对照组,SAMP8小鼠随机分为模型组、三七总皂苷高剂量组(200mg/kg)、三七总皂苷中剂量组(100mg/kg)、三七总皂苷低剂量组(50mg/kg)、石杉碱甲组(0.3mg/kg)。连续治疗8周后,以Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,并检测小鼠脑组织中总超氧化物歧化酶活力(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶活力(GSH-PX)以及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量;透射电镜观察小鼠大脑自噬体;实时荧光定量PCR技术检测小鼠Lc3-I,p62,Pink1,Parkin,Ndp52,Optn,App,β-actin m RNA基因表达,Western blot方法检测小鼠脑内LC3,PINK1,Parkin,NDP52,OPTN,β-actin蛋白的表达水平。结果:在水迷宫试验中发现,三七总皂苷中剂量及低剂量组小鼠学习记忆能力显著改善。进一步观察动物脑组织抗氧化相关酶系统发现,与模型组相比,三七总皂苷中、低剂量组小鼠脑内的GSH-PX活性明显升高(P<0.01);各组小鼠脑内的GSH含量明显升高(P<0.01);三七总皂苷中剂量组小鼠脑内SOD活性明显升高(P<0.05);同时各组小鼠脑内的MDA活性明显下降(P<0.05或P<0.01)。并且对8-OHd G的检测发现,与模型组相比,三七总皂苷中、低剂量组的8-OHd G含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。正常对照组小鼠神经元超微结构基本正常;SAMP8小鼠神经元到线粒体出现严重结构损伤,并出现分散的内质网和溶酶体小体;经三七总皂苷处理的小鼠神经元细胞的超微结构趋于正常,三七总皂苷低剂量组可见自噬体出现。并且三七总皂苷中剂量组和低剂量组脑组织的LC3蛋白表达水平显著上升(P<0.05)。实时荧光PCR观察结果显示:三七总皂苷中剂量组小鼠脑组织的Pink1 m RNA表达水平明显升高(P<0.05);中剂量组和低剂量组小鼠脑组织的Parkin m RNA(P<0.05)、Optn m RNA(P<0.05)、Ndp52 m RNA(P<0.05)表达水平均显著高于模型组。Western blot分析结果显示:与模型组比较,三七总皂苷中剂量组的Parkin蛋白(P<0.05)及OPTN蛋白(P<0.05)表达水平均显著上升;此外,各组脑组织的NDP52蛋白表达水平显著上升(P<0.01)。结论:三七总皂苷100mg/kg及50mg/kg在改善痴呆模型小鼠的学习记忆能力的同时,减少SAMP8小鼠脑内DNA损伤,增强抗氧化酶系统的功能,减轻神经细胞的氧化应激损伤;三七总皂苷能够通过控制线粒体自噬的PINK1下游通路,尤其是影响Parkin蛋白参与的线粒体自噬方式,调节神经细胞线粒体自噬稳态,产生治疗AD的效果。