基于OPG/RANKL信号轴探究紫草素对MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chichuren
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目的:探究紫草素对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1 cells)增殖、成骨分化的影响及OPG/RANKL信号轴在其中的作用。方法:MC3T3-E1细胞体外培养,实验分为对照组和不同浓度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L)紫草素实验组,给药24、48、72 h后CCK-8法检测细胞增殖抑制率;使用碱性磷酸酶(ALP)活性试剂盒检测MC3T3-E1细胞ALP活性水平;运用NBT/BCIP试剂盒进行ALP染色鉴定;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、Ⅰ型胶原(COL-I)基因表达水平;茜素红染色观察矿化结节的形成。结果:0.0625、0.125、0.25、0.5μmol/L的紫草素组较对照组显著促进MC3T3-E1细胞增殖(aP<0.05),高于0.5μmol/L的紫草素组显著抑制MC3T3-E1细胞生长(bP<0.05);安全浓度下的紫草素组呈浓度依赖性促进成骨细胞增殖、分化和矿化;RT-PCR结果显示与对照组相比,安全浓度下的紫草素组显著促进OPG、RUNX2、COL-I表达,抑制RANKL表达(P<0.05)。结论:紫草素能促进MC3T3-E1细胞增殖、分化及矿化,可能是通过调节OPG/RANKL信号轴及成骨相关基因实现的。
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