第一部分桑叶提取物对豚鼠离体回肠结肠肠肌张力变化的影响便秘常常伴有肠肌张力下降、大便干燥变硬等特点。研究显示桑叶具有降糖降脂、抗炎、抗氧化、抗肿瘤及提高免疫力等药理作用,并具有整肠作用。探究春季蛋白桑水提物（Extracts of Spring Mulberry Leaves,ESML）和药典用霜桑叶提取物（Extract of Frosted Mulberry Leaves,EFML）的成分分布并观察对豚鼠离体肠段的作用,观察其对肠肌张力的影响,为桑叶资源充分利用及改善便秘作用产品研发提供依据。目的:探究ESML和EFML成分分布并观察其对豚鼠肠肌张力的影响,为蛋白桑叶的应用提供实验依据。方法:1.制备ESML和EFML,通过高效液相法初步观察两者成分及含量,并通过紫外分光光度法测定二者总黄酮的含量。2.健康清洁级雄性豚鼠10只,取结肠、回肠部位各0.8cm置于连接张力换能器的恒温水浴槽中,分别记录给药前后其肌张力变化,观察不同桑叶提取物对豚鼠离体肠肌自发活动及对卡巴胆碱收缩反应的影响。结果:1.紫外分光光度法测定得ESML总黄酮含量为7.67%,EFML总黄酮含量为14.31%。2.离体实验结果:2.1对肠肌自发活动收缩幅度的影响:ESML对结肠低剂量给药抑制（P<0.05）而高剂量给药促进（P<0.05）,对回肠低剂量给药促进（P<0.01）,高剂量给药有促进趋势但无统计学差异;EFML总体呈现抑制作用,其中结肠低剂量给药（P<0.01）和回肠高剂量给药（P<0.05）作用最明显。2.2对肠肌自发活动平均值的影响:ESML不同剂量对结肠均抑制（P<0.01）,对回肠均促进（P<0.05）;EFML不同剂量对回肠结肠均明显抑制（P<0.01）。2.3对卡巴胆碱所致肠肌张力变化值的影响:ESML对回肠结肠均表现为低剂量促进（P<0.05）、高剂量抑制（P<0.05）,EFML不同剂量对回肠结肠均表现为抑制作用（P<0.01）,且剂量越高抑制效应越强。结论:ESML对离体豚鼠肠肌运动主要为促进作用,EFML对肠肌运动主要为抑制作用。第二部分桑叶水提物对便秘大鼠肠道功能的影响及机制探索根据上部分结果可知,春季蛋白桑叶含有的成分有促进肠肌收缩的作用,有可能适合研发预防或改善便秘的产品。用洛哌丁胺灌胃大鼠建立长期便秘模型和初期便秘模型,观察桑叶水提物改善便秘的作用。目的:探究桑叶水提物对洛哌丁胺所致便秘模型的作用,并探讨可能的机制。方法:1.治疗给药方案:雌性清洁级Wistar大鼠20只,随机分为正常对照组6只,模型组7只,桑叶组7只,模型组和桑叶组给予洛哌丁胺（10mg/kg/d）灌胃,空白组给予等量生理盐水,造模14天后,桑叶组大鼠给予桑叶水提物（5g/kg/d）灌胃7天,模型组和空白组给予等量生理盐水。2.预防给药方案:雌性清洁级Wistar大鼠32只,随机分为正常组6只、模型3天组5只、桑叶3天组5只、模型7天组8只和桑叶7天组8只,桑叶组上午给予桑叶水提物、下午给予洛哌丁胺灌胃,模型组上午给予生理盐水、下午给予洛哌丁胺灌胃,空白组上下午各给予生理盐水,每日总剂量同上。3.记录各组期间粪便含水率和体重变化,试验周期结束后,测小肠炭末推进率,取大鼠横结肠部位,制备石蜡切片,进行HE及免疫组化染色,观察病理结构变化及黏液量的变化和AQP3、e NOS、VIP的表达情况。结果:1.大鼠粪便含水率的变化:桑叶治疗给药方案中,造模后模型组显著低于空白组（P<0.01）,桑叶治疗后含水率显著增高（P<0.05）;桑叶预防给药方案中,模型组粪便含水率低于空白组,且7天时差异显著（P<0.05）,桑叶干预第三天粪便含水率明显升高甚至高于空白组（P<0.05）,桑叶干预7天时与空白组同水平。2.大鼠小肠推进率的变化:造模不同时间,模型组小肠推进率均低于空白组,桑叶治疗和预防给药后小肠推进率明显增加且差异显著（P<0.05）。3.结肠组织形态的变化:肌层厚度模型组较空白组随造模时间的延长有变薄趋势,黏膜层厚度模型组较空白组有先增加后减少趋势,对应桑叶组较模型组均表现出相反变化趋势。4.结肠免疫组织化学结果:造模后模型组AQP3、e NOS的表达水平均高于空白组（P<0.01,P<0.05）,桑叶治疗或预防给药后降低表达,甚至低于空白组（P<0.01,P<0.05）,其中桑叶预防给药3天时效果最显著。5.结肠组织黏液的变化:AB-PAS染色结果显示模型组结肠组织切片中不同造模时间均出现紫红色中性黏蛋白,且黏液面积减少,桑叶组对这一变化有纠正作用且给予桑叶3天时黏液面积增加最多。结论:桑叶水提物治疗给药对长期便秘模型有显著的改善作用,桑叶预防给药给药对慢性便秘模型也有较好的预防作用,其机制与增加肠肌厚度、促进肠道蠕动、调节肠道黏液分泌、抑制AQP3、e NOS的表达有关。