蓝百合组织培养再生体系的建立

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本研究以蓝百合的叶片、根、花梗等为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA、IBA等不同种类浓度的激素以及营养物质的培养基上,通过愈伤组织和不定芽的诱导、继代、生根、移栽,分别从不定芽和愈伤组织两种途径确立一套较为系统的‘蓝色大花蓝百合’Agapanthus praeco ssp.orientalis‘Big Blue’简称(SVH)组织培养快速繁殖技术体系,研究了影响蓝百合组织培养和植株再生的主要因素,着重探讨适合‘蓝色大花蓝百合’的最佳培养基配方及培养程序。主要研究结果如下:(1)以蓝百合的叶片、根、花梗等为外植体,经过筛选和初代培养,表明幼胚的再生能力最强,诱导幼胚愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/l+2,4-D1.0mg/l+KT0.05mg/l,诱导率为78.3%。不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA2.0mg/l+IBA0.1mg/l,分化率为86.4%,分化出的不定芽可以正常生长,转入到生根培养基中可以生根成为完整的再生苗。(2)花梗外植体不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA2.0mg/l+IBA0.1mg/l,分化率为59.6%。(3)根外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA0.2mg/l+PIC1.0mg/l,出愈率为59.6%,愈伤组织呈现松散的淡黄绿色,经过诱导的愈伤组织并没有继续分化。(4)蓝百合种子在无菌条件下萌发的理想条件为:黑暗条件下,接种于MS+NAA0.5mg/l上,萌发率为86.2%。(5)再生苗的增殖最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/l+NAA0.05mg/l。在此浓度配比下,再生苗生长健壮,植株增殖生长快,生长健壮,叶片绿色,增殖倍数达到3.56。(6)蓝百合生根最佳培养基为1/2MS+IBA0.1mg/l,根生长健壮,生根数量多且根粗壮,再生苗长势好。此外,蓝百合在不附加任何激素的培养基上也可生根,是一种极易生根的植物。(7)经由不定芽诱导得到的组培苗长到2cm高时,选择健壮的小苗,揭开三角瓶上的封口膜在瓶内炼苗3-5d,水培5-7d。然后栽入灭菌的蛭石中,10d内注意适当遮荫,并及时喷水,组培苗成活率达到93.3%。
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