无溶剂及微乳液体系中脂肪酶催化油脂水解反应研究

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本文主要研究了以下内容:1.以脂肪酶LIPASE LVK及脂肪酶Lipase AY 30G为主要研究酶,探讨无溶剂体系及AOT/异辛烷/磷酸盐缓冲液微乳液体系中脂肪酶催化油脂水解制备脂肪酸的条件优化,考察了酶浓度,物料比,反应温度,pH,缓冲液种类和浓度,摇床转速,反应时间,溶剂,添加剂,AOT浓度等因素对酶促油脂水解的影响规律,得到了不同体系中各因素的较佳值,同时对脂肪酶Lipase F-AP15的水解条件及水解特点作了研究。2.对两种体系中的动力学进行了初步探索和比较,研究了反应初速率与酶浓度和底物浓度的关系,并通过Arrhenius方程计算了反应活化能,无溶剂及微乳液中的反应活化能分别为32205J·mol-1和7391J·mol -1。由Lineweaver-Burk双倒数图得到了米氏常数分别为0.135 mol·L-1和0.101 mol·L-1,研究了乙醇抑制及底物抑制,在两种体系中,乙醇对水解反应均表现为竞争性可逆抑制,都在底物浓度大于0.819 mol·L-1时,出现底物抑制现象。酶在无溶剂体系中的热稳定性高于微乳液中。3.采用皂化酸化法对水解产物进行了分离,通过薄层层析和分析单甘酯含量对产物进行了测试。初步考察了LIPASE LVK及Lipase AY 30G,Lipase F-AP15对酯键位置和脂肪酸类型的选择性,LIPASE LVK及Lipase AY 30G无位置及脂肪酸类型选择性,Lipase F-AP15具一定的酯键位置选择性。
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