论文部分内容阅读
【目的】观察电针对大鼠下肢癌痛的缓解作用及镇痛机制,探索NRG1/Erb B2信号通路在该机制中所发挥的作用,为癌痛患者的针灸治疗提供实验依据和新的思路。【方法】将雌性SD大鼠60只随机分为5组,分别为空白组、模型组、假手术组、电针组和拮抗剂组,每组各12只。模型组,电针组和拮抗剂组的大鼠右足胫骨在实验第8天接受Walker 256癌细胞定量注射造模,假手术组以同样的方法进行等量PBS溶液注射。造模11天后,进行电针干预和Erb B2拮抗剂PD168393鞘内注射,电针参数为2m A,2/100Hz,30min/次,选穴为华佗夹脊双侧L3-L5。两组干预方法均为隔天1次,一共3次。每一组大鼠都在次治疗结束以后1h后,进行机械痛觉敏化缩足阈值（MHPWT）检测,并于最后一次治疗后取脊髓L3-L5节段和右侧胫骨,使用Western blot法测定各组L3-L5脊髓背角的GFAP、Iba-1、Erb B2、NRG1和p-Akt的表达情况,ELISA测定各组L3-L5脊髓背角的IL-1β、IL-6和TNF-α含量,使用HE染色法观察右侧胫骨造模后的病理变化。使用电脑软件SPSS 26.0处理各类数据并进行统计分析。【结果】（1）右足MHPWT结果:空白组与假手术组的右足MHPWT整个实验过程中的变化趋势不存在统计学差异（P＞0.05）,模型组与电针组的右足MHPWT整个实验过程中的变化趋势存在明显的统计学差异（P＜0.05）,电针组与拮抗剂组的右足MHPWT整个实验过程中的变化趋势不存在明显的统计学差异（P＞0.05）;模型组造模后的右足MHPWT与造模前相比显著下降（P＜0.002=0.05/21）;拮抗剂组与电针组的造模后与造模前的右足MHPWT相比,显著下降（P＜0.002）,三次干预后与干预前的右足MHPWT相比,显著上升（P＜0.002）;三次干预后,电针组与拮抗剂组的右足MHPWT均高于模型（P＜0.05）。（2）左足MHPWT结果:模型组与空白组的左足MHPWT整个实验过程中的变化趋势存在明显的统计学差异（P＜0.05）。模型组与电针组的左足MHPWT整个实验过程中的变化趋势存在明显的统计学差异（P＜0.05）;模型组造模后的左足MHPWT与造模前相比均有显著下降（P＜0.002=0.05/21）;拮抗剂组与电针组造模后与造模前的左足MHPWT相比,显著下降（P＜0.002）,三次干预后与干预前的左足MHPWT相比,显著上升（P＜0.002）;三次干预后,电针组与拮抗剂组的左足MHPWT均高于模型（P＜0.05）。（3）体重结果:电针组中大鼠体重造模后显著低于造模前（P＜0.008=0.05/6）,经干预后小幅上升（P＜0.008）。拮抗剂组中大鼠体重造模后显著低于造模前（P＜0.008）,干预后继续下降（P＜0.008）。（4）HE染色:未注射癌细胞的大鼠胫骨新生骨组织内结构清晰,软骨细胞柱排列有序,内未见破骨细胞繁殖,注射癌细胞的大鼠胫骨过度型骨小梁之间可见大量癌细胞浸润,新生骨组织纹理模糊不清,软骨细胞柱遭到破坏,吸收凹陷内破骨细胞大量增殖。（5）脊髓背角NRG1表达:空白组,假手术组的灰度值均低于模型组（P＜0.05）,电针组的灰度值低于模型组（P＜0.05）,拮抗剂组的灰度值高于空白组（P＜0.05）,与模型组无差异。（6）脊髓背角Erb B2表达:空白组,假手术组的灰度值均低于模型组（P＜0.05）,拮抗剂组的灰度值同样低于模型组（P＜0.05）。电针组的灰度值相比空白组,模型组都无差异（P＞0.05）,均值低于模型组且高于空白组。（7）脊髓背角p-Akt表达:空白组,假手术组,电针组和拮抗剂组的灰度值均低于模型组（P＜0.05）。（8）脊髓背角IL-1β含量:空白组,假手术组,电针组与拮抗剂组的IL-1β含量均低于模型组（P＜0.05）,电针组与拮抗剂组的IL-1β含量均高于空白组（P＜0.05）（9）各组大鼠脊髓背角IL-6表达:空白组,假手术组,电针组与拮抗剂组的IL-6含量均低于模型组（P＜0.05）,电针组与拮抗剂组的IL-1β含量与空白组无差异（P＞0.05）。（10）各组大鼠脊髓背角GFAP表达:空白组,假手术组,电针组与拮抗剂组的GFAP表达量均低于模型组（P＜0.05）。（11）各组大鼠脊髓背角Iba-1表达:空白组和假手术组的Iba-1表达量均低于模型组（P＜0.05）,电针组与拮抗剂组的Iba-1表达量高于空白组（P＜0.05）。【结论】（1）电针治疗可以缓解大鼠乳腺癌骨转移所致的患侧胫骨疼痛和健胫骨侧疼痛。（2）电针可能通过下调脊髓背角中NRG1蛋白表达,抑制NRG1/Erb B2信号通路的转导和下游信号通路PI3K/Akt激活产生患侧癌痛缓解的作用。另一方面,电针可能通过抑制星形胶质细胞活化,减少胶质细胞分泌炎性因子,缓解健侧的神经病理性癌痛。（3）电针可能通过调控NRG1/Erb B2信号通路干扰星形胶质细胞的活化。