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化疗是肿瘤治疗的一种主要手段,但其疗效有限。由于传统化疗往往采用最高耐受剂量,所以副作用较大。近年来,人们在尝试一种称之为节拍化疗的新方法,即低剂量高频率的化疗。本论文以节拍化疗为基础,分析不同剂量和给药频率的节拍化疗对肿瘤浸润免疫细胞和肿瘤血管的影响,并把这种具有肿瘤微环境重塑作用的节拍化疗方案命名为“调节性化疗”。我们主要研究吉西他滨节拍化疗(Met-GEM)对EO771和4T1原位乳腺肿瘤微环境中免疫细胞和血管的影响。试验结果显示:在EO771小鼠模型中,Met-GEM治疗对EO771的生长曲线无影响。Met-GEM显著减少了肿瘤微环境中的髓源抑制性细胞(MDSCs)和单核髓源抑制性细胞(M-MDSCs),但对粒细胞样髓源抑制性细胞(G-MDSCs)没有影响,甚至在4 mg/kg daily和6 mg/kg daily的Met-GEM治疗组中有所增加。Met-GEM治疗还减少了CD4~+和CD8~+T淋巴细胞,在亚群中,CD4~+CD25~+在各给药组均显著降低,而CD4~+CD279~+和CD8~+CD279~+主要在5 mg/kg daily和6 mg/kg daily治疗组中减少。此外,Met-GEM治疗增加了活化型CD8~+CD69~+和CD4~+CD69~+在CD8~+和CD4~+细胞群中的比例。另外,6 mg/kg daily的Met-GEM治疗显著减少了EO771乳腺肿瘤的血管密度。这些结果表明,Met-GEM治疗(6 mg/kg daily)可以重塑肿瘤的免疫微环境,减少其免疫抑制性。在4T1模型中,1 mg/kg daily和3 mg/kg 3days的Met-GEM治疗可以抑制肿瘤的生长。在4T1肿瘤微环境中,2 mg/kg 3 days和3 mg/kg 3 days的Met-GEM治疗不仅减少了G-MDSCs,增加了CD8~+和CD4~+T淋巴细胞,而且增加了M1型巨噬细胞的比例和减少M2型巨噬细胞的比例。但Met-GEM治疗对4T1乳腺肿瘤血管没有影响。这些结果表明Met-GEM治疗(3 mg/kg 3 days)可以减少4T1肿瘤组织的免疫抑制性。以上结果显示,Met-GEM治疗可以显著改善乳腺肿瘤的免疫微环境,但其作用机制因不同肿瘤而异。首先,Met-GEM治疗可以显著减少两种乳腺肿瘤模型中的MDSCs,但对亚型的影响相反。第二,Met-GEM治疗显著减少了EO771肿瘤中的T淋巴细胞,特别是免疫抑制性的T淋巴细胞亚群,包括CD4~+CD25~+,CD4~+CD279~+和CD8~+CD279~+,同时增加了免疫活化型的T淋巴细胞亚群(CD4~+CD69~+和CD8~+CD69~+)。而在4T1中,Met-GEM治疗则增加了CD4~+和CD8~+T淋巴细胞群。第三,Met-GEM治疗使4T1肿瘤组织中的TAMs从M2向M1型极化,但在EO771中则没有显著的作用。最后,Met-GEM治疗减少了EO771肿瘤血管密度,但对4T1的血管密度则没有影响。综上所述,在不同乳腺肿瘤模型中,Met-GEM治疗在一定的给药方案下可以重塑肿瘤免疫微环境,减少免疫抑制性。这种“调节性化疗”方案的建立为后续发展新型高效的免疫联合治疗提供了一些理论依据。