【摘 要】
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近年来,基因工程和组织工程的发展为临床治疗骨缺损带来了希望.通过基因工程技术和组织工程技术相结合,将细胞因子基因转染细胞植入骨缺损,一方面利用移植细胞高效分泌的细胞
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近年来,基因工程和组织工程的发展为临床治疗骨缺损带来了希望.通过基因工程技术和组织工程技术相结合,将细胞因子基因转染细胞植入骨缺损,一方面利用移植细胞高效分泌的细胞因子促进骨损伤修复;另一方面移植细胞可增殖、分化,合成细胞外基质,完成修复过程.组织工程技术与基因工程技术的有机结合,不仅克服了细胞因子局部应用的缺点,而且通过基因修饰可以更好地调控移植细胞的生物学活性,这将是治疗骨缺损最有效的解决途径.碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一种能广泛促进来源于中胚层和神经外胚层细胞增殖的生物活性物质,在体内含量甚微,但它具有广泛的生物学效应.近年来随着研究的深入,发现bFGF在骨损伤修复中发挥着极为重要的作用.目的:1.通过将bFGF-pcDNA3重组真核表达质粒转染骨髓基质细胞(BoneMarrow Stromal Cells,BMSCs),获得能持续稳定表达该基因的骨髓基质细胞.2.研究该转基因细胞生物学性状的改变,探讨细胞因子在骨缺损基因治疗的可行性,并为进一步的体内实验奠定基础.结论:1.通过密度梯度离心和贴壁相结合的方法可以成功分离获得BMSCs.2.用脂质体转染法能将bFGF-pcDNA3重组真核表达载体成功导入体外培养的BMSCs,筛选得到稳定表达bFGF的BMSCs细胞株,建立bFGF体外真核表达系统.3.表达bFGF的BMSCs能促进自身的增殖,并不抑制细胞向成骨细胞方向分化,初步认为bFGF基因转染BMSCs能作为骨组织工程的种子细胞.
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