TNFAIP8家族在胃癌及心脏移植中的作用

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目的:TIPE及TIPE2是TNFAIP8(Tumor necrosis factor-αinduced protein-8,TIPE,TNFAIP8)家族的重要成员,TIPE是调控凋亡进程的重要分子,本研究之一是应用TIPE不同表达的BGC823细胞株建立胃癌裸鼠移植瘤模型,观察TIPE对移植瘤生长的影响;同时收集并检测胃癌临床标本TIPE的表达特点,分析TIPE与胃癌临床病理特征的关系,明确TIPE与胃癌生物学行为的关系及对胃癌生长的影响。  TIPE2为免疫负性调控因子,对免疫稳态的维持起重要作用。本研究之二为构建异种心脏移植模型,在移植后的不同时间点收集移植物和脾脏组织,检测TIPE2蛋白及mRNA水平表达特点,同时检测细胞因子的变化及免疫细胞的浸润,分析三者之间的联系,探讨TIPE2在异种移植中的可能作用。  方法:第一部分:利用实时荧光定量PCR法检测16例胃癌组织及癌旁正常组织中TIPE mRNA的表达,分析不同组织TIPE mRNA的表达情况。结合临床资料,分析TIPE在胃癌发生、发展以及浸润、转移的关系。  第二部分:应用TIPE表达差异的BGC823细胞株,接种于裸鼠建立裸鼠胃癌移植瘤模型,每天应用伊立替康治疗并测量裸鼠体重及肿瘤大小,治疗两周后取肿瘤称重,肿瘤组织经HE染色明确肿瘤坏死程度,分析TIPE对胃癌生长的影响。  第三部分:将仓鼠的心脏异位移植到大鼠颈部,建立异种心脏移植模型。实验分为3天来氟米特干预组(来氟米特组)和不给药组,并将不给药组根据检测时间不同分为1天组和3天组,通过PCR检测TIPE2在移植心、脾脏、淋巴结中的表达,同时通过ELISA检测受体大鼠外周血里细胞因子的变化,HE检测移植心病理变化,分析三者间的联系。  结果:胃癌组织TIPE mRNA的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),两者差异显著,具有统计学意义,TIPE mRNA表达量与淋巴结转移、TNM相关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05)。  体内实验观察到,伊立替康作用不同TIPE表达的胃癌细胞建立的肿瘤模型,干扰组14天肿瘤质量与体积分别为(0.012±0.002g,137.95±16.78mm3),对照组裸鼠肿瘤质量与体积分别为(0.021±0.003g,178.13±26.95mm3),组间差异显著,具有统计学意义。  来氟米特显著的抑制移植后的急性排斥反应,减少炎性细胞的浸润,延长了异种移植的生存期。TIPE2在心脏移植物中的表达随着排斥进展而升高,在来氟米特组的表达低于3天组,差别具有统计学意义(P<0.05)。TIPE2在脾脏、淋巴结的表达随着排斥进展而升高,在来氟米特组的表达高于于3天组,差别具有统计学意义(P<0.05)  结论:TIPE能够促进胃癌细胞的增殖,干扰TIPE的表达,可以增强胃癌细胞的凋亡敏感性。提示TIPE可能参与了胃癌的发生、发展。TIPE可能为进一步研究胃癌的发病机制提出一种新的思路。  TIPE2表达量随着免疫排斥程度不同而呈现不同变化。提示TIPE2可能参与了免疫排斥反应,进一步探索TIPE2在移植免疫当中的可能机制,为寻找免疫抑制新策略提供了曙光。
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