论文部分内容阅读
目的放疗相关的的认知功能损伤的发生主要与小胶质细胞细胞过度激活所致的慢性神经系统炎症反应及神经发生减少有关。本研究通过观察人脐带间充质干细胞对小胶质细胞增值及活化的影响以及对神经干细胞分化能力的影响,研究人脐带间充质干细胞神经系统炎症反应以及神经发生的调节作用,为今后临床治疗放疗相关的认知功能损伤提供新思路,同时为间充质干细胞的临床应用开辟新领域。方法利用脂多糖(LPS)刺激小胶质细胞模拟神经炎症反应,将BV2细胞与人脐带间充质干细胞来源的条件培养基(h UC-MSCs-CM)和(或)脂多糖(LPS)共培养24或48小时后利用MTT比色法分析BV2增殖活力的变化;ELISA法分析BV2细胞上清中TNF-a和IL-6的变化;免疫印迹法检测精氨酸酶1(Arg1)的表达;real-time PCR分析TNF-a、IL-6、ARG1基因的表达水平。利用transwell小室将NE-4C细胞分别与M1、M2型小胶质细胞进行隔离共培养48h后,应用免疫印迹法检测GFAP、β3-Tubulin和β-catenin蛋白的表达情况。结果1 BV2在LPS长程刺激下表现出明显的增殖效应,而h UC-MSCs-CM可以抑制这种增殖反应;2 LPS刺激诱导BV2大量分泌TNF-a和IL-6两种炎症因子,而在h UC-MSCs-CM和LPS共刺激时TNF-a和IL-6的表达明显低于LPS单刺激组;3 h UC-MSCs-CM共培养组BV2细胞高表达Arg1;4 M2型小胶质细胞与NE-4C共培养组GFAP及β-catenin的表达升高,而β3-Tubulin的表达未见明显改变。结论1脐带间充质干细胞抑制炎症所致的小胶质细胞增殖。2脐带间充干细胞抑制小胶质细胞释放炎症因子TNF-a和IL-6。3脐带间充干细胞能够调节小胶质细胞向M2型活化。4 M2型小胶质细胞可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进神经干细胞向星形胶质细胞分化。