【摘 要】
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神经肽是昆虫体内数量最多种类最丰富的一类胞外信号分子,在昆虫生命中几乎所有的生理过程中发挥着重要的调节作用。神经肽RYamide是在昆虫中新发现的一类神经肽家族,几乎存
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神经肽是昆虫体内数量最多种类最丰富的一类胞外信号分子,在昆虫生命中几乎所有的生理过程中发挥着重要的调节作用。神经肽RYamide是在昆虫中新发现的一类神经肽家族,几乎存在于所有昆虫中,它的结构特征是C末端具有共同序列FFXXXRYamide,并参与调节多种生理过程。然而目前对其信号转导途径和生理功能还不是特别清楚。本文从家蚕组织中克隆得到了生物信息学推定的RYamide受体BNGR-A19,并在哺乳动物细胞HEK293T和昆虫细胞Sf9中进行功能性表达。结果表明,BNGR-A19能够被神经肽RYamide激活,通过偶联G_q蛋白引起胞内CRE驱动的报告基因荧光素酶的转录和钙离子动员。被RYamide激活的BNGR-A19还可以通过G_q-PLC-PKC通路介导ERK1/2的活化,并且快速从细胞膜内吞到细胞质中。在激活BNGAR-A19时,RYamide-2表现出比RYamide-1更强的激活效应。不同家蚕神经肽的交叉反应发现,BNGR-A19仅能被高浓度(1μM)的家蚕速激肽-1、神经肽F-1和短神经肽F-1微弱的激活,高浓度的RYamide也能微弱的激活家蚕神经肽F受体和短神经肽F受体,表明BNGR-A19是RYamide,尤其是RYamide-2的特异性受体。此外,qRT-PCR结果显示,BNGR-A19在五龄蚕的直肠和睾丸组织中高表达,表明RYamide信号通路可能参与调节摄食、水平衡和睾丸发育等生理过程。本研究首次揭示了家蚕RYamide受体BNGR-A19的详细信号转导机制,为进一步阐明其在昆虫内分泌系统中的生理功能提供了研究基础。
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