肝切除时不同入肝血流阻断方法对残肝再生过程中CyclinD1和IL6的影响

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目的通过比较经保留半肝动脉血供的入肝血流阻断方法、半肝血流阻断方法和Pringle法干预过的动物,分别建立经典的70%肝切除肝再生动物模型,重点分析保留半肝动脉血供的入肝血流阻断方法对大鼠残肝细胞再生过程的影响。方法雄性,体重200~250g之间SD大鼠120只按体重以随机区组方法分为保留半肝动脉血供的入肝血流阻断方法组(WH组)、半肝血流阻断方法(HH组)和Pringle法组(PR组),每组40只大鼠。每组采用相应的肝门阻断方法阻断大鼠肝门15分钟,在放开无损伤动脉夹同时切除肝中叶、左内叶和左外叶(70%肝切除)以诱导肝再生。并于术后6小时、12小时、24小时、4天和7天各时点(每个时点8只大鼠)取材,观察、比较肝重体重比恢复情况,计数10个高倍视野下处于有丝分裂状态细胞总数,免疫组化法测量CyclinD1蛋白的表达并用图像分析仪测定累计积分光密度值(IOD),放免法测定血清IL-6浓度,分析比较保留半肝动脉血供的入肝血流阻断方法对残余肝再生的影响。实验结果1、肝重体重比:各组之间24小时肝重体重比无明显差异(P>0.05);术后4天WH组肝重体重比大于PR组(P<0.05),和HH组没有差别(P>0.05),而术后7天WH组大于PR组(P<0.05)和HH组无明显差异(P>0.05),各组均明显低于正常组(P<0.05)。2、核分裂相计数:术后24小时WH组多于PR组(P<0.05),和HH组无差异(P>0.05);术后4天WH组多于PR组(P<0.05),和HH组无差异(P>0.05);术后7天各组之间无明显差异(P>0.05)。各时点均高于正常组(P<0.05)。3、CyclinD 1蛋白表达:各组术后6小时无明显差异(P>0.05),术后12小时WH组明显优于PR组(P<0.05),和HH组无明显差异(P>0.05)。术后24小时WH组明显优于PR组(P<0.05),和HH组无明显差异(P>0.05)。各时点均高于正常组(P<0.05)。4、血清IL-6水平:术后各组IL-6水平在术后6小时即已达到高峰,到术后24小时逐渐降低;各时点仍高于正常组(P<0.05)。术后6小时WH组明显高于PR组(P<0.05),而和HH组无明显差异(P>0.05);术后12小时WH组明显高于PR组(P<0.05),而和HH组无明显差异(P>0.05);各组术后24小时无明显差异(P>0.05);但各组仍高于正常组(P<0.05)。结论1、肝切除过程中行保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法在促进大鼠残肝再生方面与半肝血流阻断法有同样效果,优于Pringle法。2、保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法,使肝再生过程中IL-6升高较快和CyclinD1表达升高,可能是其促进残肝较快再生的机制之一。
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