续断规范化生产试验及示范基地药材质量控制关键技术研究

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续断为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall.ex Henry的干燥根。为治疗跌扑损伤的常用药,疗效确切,药用历史悠久,为中医骨伤科常用方剂配方要药之一,也是中药及中成药的常用要药,同时也是贵州特色药材。贵州作为续断主产区之一,为求稳定制药业原材料供应、壮大升级产业链,已对续断规范化种植技术研究及GAP基地建设设立专项攻关,通过对续断进行资源整理,引种驯化筛选及系统质量控制,以完成对续断的规范化、标准化、规模化、产业化生产研究。  本项目针对贵州恒霸药业有限公司清镇续断规范化种植建设基地项目,承担质量控制研究工作,以高效液相色谱法为主要分析测试手段,对续断的HPLC特征图谱进行研究,并结合川续断皂苷Ⅵ及水溶性浸出物含量指标综合评价续断质量,通过定性、定量结合的手段研究续断品质,完成对续断规范化生产试验基地药材的质量研究,本研究成果能为贵州清镇续断规范化种植及申报GAP认证提供技术支撑。研究结果如下:  1.续断综合质量评价研究  1.1续断HPLC特征图谱研究  本文对不同产区续断HPLC特征图谱进行了系统研究,用采自四川、贵州、云南、湖北等主产区的11个批次续断药材,研究建立了续断药材特征图谱方法并获得了标准特征图谱,并从建立的续断标准特征图谱中标示出18个特征峰,经方法学考察,表明该特征图谱精密度、稳定性、重复性良好;不同产地续断药材化学成分组成基本相同,但各组分含量差异较大。此法可应用推广作为续断药材的真伪、优劣的鉴别手段;同时,指纹图谱聚类分析结果表明;黔产续断与其它主产区续断的质量差异较小,关系较近,但不同主产区续断药材质量差异客观存在;从源头上控制续断药材质量的关键在于大力开展续断规范化生产技术研究。  1.2续断定量评价方法确定  川续断皂苷Ⅵ、水溶性浸出物为《中国药典》(2010年版)续断项下收载的定量指标,是评价续断药材质量的关键成分;故本文将川续断皂苷Ⅵ及水溶性浸出物定量数据作为续断质量评价指标,用于续断规范化种植研究,应用于包括产地初加工工艺、优良种源筛选,最佳采收期、不同栽培技术评价、地理种群质量分布等研究内容的定量分析手段。  2.贵州清镇续断规范化生产试验关键技术研究  2.1优良种源选育  通过搜集四川、贵州、云南、湖北等主产区的27个批次续断药材样本,依据其川续断皂苷Ⅵ、水溶性浸出物含量测定结果,筛选出重庆金佛山与云南保山两个续断优良种源,对两地种源进一步实施良种繁育比较试验后证明,云南保山地区的续断在生物学性状、质量及产量更优,故初步确定云南保山续断为优良种源。  2.2续断产地加初工方法研究  通过研究明确了续断的产地加工关键技术参数为:鲜品续断(含水量约为80%,其折干率约为20%,最适干燥温度为80℃)先在80℃下烘去60%以上的水分后,取出堆置发汗,保持空气流通,环境温度控制在30±2℃,相对湿度为60±5%,发汗至内部呈绿色,再80℃烘干即可。  2.3不同生长年限续断质量对比研究  不同采收年份续断定量分析及样方测产数据的对比研究表明:续断中川续断皂苷Ⅵ的动态积累与生长、发育周期密切相关。续断产量与其生长年限呈正相关,但1年生续断产量远远低于其它生长年限续断,随生长年限的增加,续断产量虽逐年增加,但川续断皂苷Ⅵ含量会有一定程度下降,综合质量及产量数据,2年生续断为最适采收年限。  2.4不同采收期的续断质量研究  不同采收月份续断主要成分含量的对比研究表明:续断中川续断皂苷Ⅵ的积累受季节变化影响较为明显,水溶性浸出物含量波动较平稳;9月至10月间川续断皂苷Ⅵ含量逐渐增加;10月中旬时,川续断皂苷Ⅵ及水溶性浸出物含量最高;10月至12月间,川续断皂苷Ⅵ及水溶性浸出物含量均有所下降。建议黔产续断秋季最适采收时间定为10月中旬。  2.5不同栽培技术研究  续断现阶段栽培技术有种子直播和大棚育苗移栽两种,研究结果表明:不同栽培方式续断的质量、产量及生物性状特征有明显差异。大棚育苗移栽方式在产量、生物性状方面均优于种子直播,但川续断皂苷Ⅵ、水溶性浸出物含量说明,种子直播方法种植所得续断药材优于大棚育苗移栽法,但两种栽培方式均存在贵州栽培续断川续断皂苷Ⅵ含量达不到药典要求的情况,原因有待进一步深入研究。建议进一步对种子直播法、大棚育苗移栽法进行技术改良,提升药材质量。  2.6不同等级标准续断质量研究  依据贵州恒霸药业有限公司制定的续断药材优良单株分级标准对清镇续断规范化生产基地药材划分为优秀、良好、中等、差四个等级,经对不同等级续断药材进行川续断皂苷Ⅵ及水溶性浸出物含量测定,结果为:中等级>差级>良好级>优秀级,表明优势单株分级与续断药材内在质量未呈现正相关,现行企业制定的续断种株分级标准不尽合理,不能真实反映续断药材的内在质量,建议企业将续断质量指标、生物性状和样方测产等指标纳入综合评分,重新划分续断药材等级。
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