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目的：观察和比较人胶质瘤细胞抗原IL-13Rα2致敏的DC-CTL对人胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞的体外杀伤效应，为胶质瘤的免疫治疗打下实验基础。
方法：用神经干细胞无血清培养法培养出U251胶质瘤干细胞并用CD133、Nestin抗体进行免疫荧光鉴定；Ficoll密度梯度离心法分离获得HLA-A*0201+健康志愿者的外周血单个核细胞，种植于RPMI1640细胞培养液中培养4h，收集非贴壁细胞(淋巴细胞)，种植于含10％人AB血清、200IU/mlrhIL-2的RPMI1640细胞培养液中。贴壁细胞用含1000IU/mlrhGM-CSF、1000IU/mlrhIL-4的RPMI1640细胞培养液培养，体外诱导成树突状细胞(DCs)，人工合成的IL-13Rα2(345-354抗原多肽负载DCs，添加rhTNF-α刺激DCs进一步成熟。将成熟的DCs、IL-13Rα2(345-354抗原多肽与淋巴细胞共培养，激活淋巴细胞成为细胞毒T淋巴细胞，CFDA-SE/PI双荧光染料标记的流式细胞计数法检测其对U251胶质瘤干细胞和普通U251胶质瘤细胞的体外杀伤作用。
结果：胶质瘤U251细胞株在无血清培养基中分裂增殖形成细胞球，经免疫荧光检测为CD133、Nestin阳性。IL-13Rα2(345354)抗原肽致敏的DC-CTL对U251胶质瘤干细胞的杀伤率为(18.59±1.42)％，高于未用抗原肽致敏的DC-CTL及CIK对胶质瘤干细胞的杀伤率，其杀伤率分别为(10.35±0.98)％和(7.15±0.58)％，均具有统计学意义(P＜0.001)。同时，IL-13Rα2(345-354)抗原肽致敏的DC-CTL对U251胶质瘤干细胞的杀伤率也高于其对普通U251细胞(11.53±0.65)％的杀伤率(P=0.001)。
结论：成功用无血清培养法从普通胶质瘤细胞株U251中培养出胶质瘤干细胞；IL-13Rα2(345-354)致敏的DC-CTL在体外对胶质瘤干细胞具有杀伤作用，且杀伤率高于对普通的胶质瘤细胞。