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川牛膝为临床常用中药,来源于苋科杯苋属多年生草本植物川牛膝Cyathula officinalis Kuan的干燥根,具有逐瘀通经,通利关节,利尿通淋的功效,临床常通过与不同药物的配伍用于痛风等的治疗。目前主要面临抗痛风作用物质基础及组分研究缺乏等问题,鉴于此,本研究对这两方面进行了研究。 在抗急性痛风性关节炎作用的研究中,采用踝关节注射0.1ml浓度为10%尿酸钠溶液(MSU)建模,以大鼠体重、踝关节周径、IL-1β等细胞因子及UA等为测定指标,观察750mg/ml的川牛膝多糖对各指标的影响。结果表明,踝关节注射MSU可使大鼠饮食减少、精神变差、出现不同程度的跛足等,且可使其踝关节明显肿胀,尤以12h或24h时肿胀最为严重。取造模24h的关节测定发现,与空白组相比,各组指标均不同程度升高;与模型组比,秋水仙碱组各指标明显下降,多糖组IL-1β、UA测定值较低,但TNF-α、IL-6及NO测定值较高,差异多无统计学意义。提示,多糖虽可一定程度降低尿酸(UA)的含量,但可能不是通过抑制细胞因子的水平发挥作用的。 在抗高尿酸血症研究中,采用腺嘌呤(2%)与盐酸乙胺丁醇(5%)的混悬液对大鼠灌胃造模,以大鼠体重、心肝肾指数、血清及肝肾组织中尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、腺苷脱氨酶(ADA)、谷丙转氨酶(GPT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、总抗氧化能力(T-AOC)等为指标,观察750mg/ml(高糖组)、350mg/ml(中糖组)、200mg/ml(低糖组)的川牛膝多糖对各指标的影响。结果表明,造模后大鼠体重降低,各给药组心、肝、肾指数普遍高于空白组而低于模型组,且与体重相关;结合UA、BUN、CRE、ADA、GPT、SOD、GPX、T-AOC及双肾病理切片结果,认为,各给药组均有不同程度的抗高尿酸血症作用,且该作用与促进UA代谢及抗氧化能力有关。 川牛膝多糖的组分研究,采用水提醇沉的方法提取,Sevag法除蛋白,得到初步纯化的多糖。然后,Cellulose DE(二乙胺乙基-纤维素)-52与Sephadex G-100联用进一步精制。结果表明,蒸馏水可将大部分多糖洗脱,且SephadexG-100层析时以60ml/h的流速即可。为了解其含量,对川牛膝多糖分别采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝G-250染色法进行了总糖与蛋白质含量的测定,结果显示,川牛膝多糖在柱层析前后的含量分别为90.95%、98.1%,蛋白质含量分别为0.85%、0.28%。 川牛膝多糖的组分特点研究中,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱(PMP-HPLC)进行单糖组成分析,同时采用压片法对其进行了红外特征分析。结果表明,其单糖组成主要为D-甘露糖、D(+)-无水葡萄糖、D-半乳糖、D(+)-木糖及 L(-)-岩藻糖5种,其中以 L(-)-岩藻糖含量相对最高,其次为D-甘露糖与 D(+)-葡萄糖,D-半乳糖及 D(+)-木糖的含量相对较低。红外图谱解析结果表明,该样品为吡喃糖类,与PMP-HPLC结果一致。