褐藻寡糖对斜带石斑鱼生长性能、生理生化、肠道菌群及肝脏转录组的影响

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开展为期56 d的单因素饲养试验,探讨饲料中不同添加量(0.00%、0.10%、0.20%、0.40%、0.80%)的褐藻寡糖(Alginate Oligosaccharide,AlgOS)对初始体质量为(50.52±1.05)g,全长为(14±0.18)cm 的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)幼鱼生长性能、非特异性免疫、抗氧化、肝肠组织结构、肠道菌群、肝脏转录组等方面的影响,以评估AlgOS作为鱼类功能性饲料添加剂的应用潜能,为其在鱼类配合饲料的应用积累基础资料。研究的主要结果如下:1.褐藻寡糖对斜带石斑鱼幼鱼生长性能及消化酶活性的影响AlgOS对斜带石斑鱼幼鱼生长性能[成活率(SR)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、肥满度(CF)、饲料转化率(FCR)]以及胃肠道消化酶[胃蛋白酶(Pepsin)、肠道蛋白酶(TRY)、肠道脂肪酶(LPS)、肠道淀粉酶(AMS)]活性的影响不显著(P>0.05)。2.褐藻寡糖对斜带石斑鱼幼鱼非特异性免疫指标及转氨酶活性的影响AlgOS显著提高了幼鱼血清碱性磷酸酶(AKP)活性、肝脏酸性磷酸酶(ACP)活性、血清和肝脏溶菌酶(LZM)活性(P<0.05)。AlgOS显著降低了幼鱼血清谷草转氨酶(GOT)活性(P<0.05),对幼鱼血清谷丙转氨酶(GPT)活性影响不显著(P>0.05);降低肝脏中GOT活性,但差异不显著(P>0.05)。3.褐藻寡糖对斜带石斑鱼幼鱼抗氧化的影响AlgOS提高了幼鱼血清总抗氧化力(T-AOC)及超氧化物歧化酶(SOD)活性(P>0.05),显著提高了血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,降了低血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05);显著提高了幼鱼肝脏的T-AOC及SOD、GSH-Px活性,降低了肝脏MDA含量(P<0.05)。4.褐藻寡糖对斜带石斑鱼幼鱼肠道组织结构及肠道菌群的影响AlgOS显著提高了幼鱼肠道肌层厚度(MP)及粘膜皱襞高度(MFH)(P<0.05),增加肠道杯状细胞(GC)数量,对固有层厚度(LP)影响不显著(P>0.05)。AlgOS提高幼鱼肠道菌群多样性,其中0.20%和0.40%组与0.00%组(对照组)差异显著(P<0.05);能调节幼鱼肠道菌群结构,0.10%和0.80%组的幼鱼肠道厚壁菌门的相对丰度增加,变形菌门的相对丰度降低,0.40%组的幼鱼肠道互养菌门相对丰度增加。AlgOS提高了幼鱼肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌及某些可通过代谢产生短链脂肪酸(如丁酸)的有益菌(如瘤胃梭菌属)的相对丰度,抑制有害菌(如克雷伯氏菌)在肠道中定植。5.褐藻寡糖对斜带石斑鱼幼鱼肝脏组织结构及肝脏转录组的影响各组的幼鱼肝细胞形态正常,未出现细胞核偏移及明显的脂肪液滴现象。AlgOS能影响幼鱼肝脏中基因表达,上调基因数在0.20%组达到平稳状态,下调基因数在0.80%组急剧增加。AlgOS能够调节降钙素相关肽(CGRP)、热休克蛋白(HSPs)、Toll样受体(TLR)、Stomatin-样蛋白2(STOML2)、脂肪酸去饱和酶(FADs)等基因在肝脏中的转录水平,许多显著下调的基因富集于丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、AMP蛋白激酶(AMPK)及NF-κB通路。这些显著差异基因、富集的代谢通路与机体炎症反应、免疫反应、脂肪代谢、能量代谢相关。综上所述,褐藻寡糖能显著提高斜带石斑鱼幼鱼机体非特异性免疫力及抗氧化力;增加肠道肌层厚度及粘膜皱襞高度,改善肠道菌群结构,有益于肠道健康;调节肝脏中与炎症反应,免疫反应、能量代谢、脂肪代谢相关的基因表达及代谢通路,对维持鱼体正常生理功能具有重要意义。综合各项指标,在斜带石斑鱼配合饲料中褐藻寡糖的推荐添加量0.20%~0.40%。
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