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目的:
探讨E-selectin及其配体sLex在大肠癌LOVO细胞与血管内皮细胞ECV304早期粘附中的作用;了解西咪替丁(Cimetidine)处理血管内皮细胞ECV304后表面E-selectin表达的变化,为肿瘤的抗粘附治疗提供理论依据。
方法:
1.采用免疫组化SP法(链霉素亲和生物素蛋白-过氧化物酶法)观察E-选择素在内皮细胞ECV304中的表达。
2.活性染料玫瑰红摄入法观察E-selectin及其配体sLex在大肠癌LOVO细胞与TNF-a激活内皮细胞ECV304早期粘附中的作用。
3.活性染料玫瑰红摄入法检测Cimetidine对大肠癌LOVO细胞与血管内皮细胞ECV304早期粘附的影响。
4.细胞ELISA法和细胞流式间接荧光抗体标记法检测不同浓度Cimetidine处理的血管内皮ECV304细胞表面E-selectin表达的变化。
结果:
1.E-选择素阳性表达于血管内皮细胞ECV304细胞浆内。
2.当血管内皮细胞ECV304被TNF-a激活后,其与LOVO细胞间的粘附较激活前明显增加,且这种作用具有TNF-a浓度及时间依赖性;用不同浓度的抗E-selectin单抗处理血管内皮细胞ECV304a或用其配体sLex单抗处理肿瘤LOVO细胞后,随着E-selectin单抗、sLex单抗浓度的增加,细胞相对粘附率逐渐降低,阻断率逐渐增加。
3.血管内皮细胞ECV304经不同浓度Cimetidine处理后,肿瘤LOVO细胞与血管内皮细胞ECV304间的粘附率随Cimetidine剂量的增加逐渐下降,E-selectin的表达亦减少。
结论:
1.E-selectin单抗、sLex单抗可阻断大肠癌细胞与血管内皮细胞间的粘附,表明E-selectin和其配体sLex是介导血管内皮细胞与大肠癌LOVO细胞粘附反应的主要早期粘附分子。
2.Cimetidine可抑制血管内皮细胞表面E-selectin的表达,从而抑制大肠癌LOVO细胞和血管内皮细胞ECV304间的粘附,用于肿瘤抗粘附治疗有一定意义。