【摘 要】
:
本文发展了一种反向免疫共沉淀分离纯化病毒的新方法,用于从培养物中分离高纯度,高活性的蓝舌病毒。用透射电镜和凝胶过滤层析检测纯化产物病毒的结构完整性和纯度;组织培养技术
论文部分内容阅读
本文发展了一种反向免疫共沉淀分离纯化病毒的新方法,用于从培养物中分离高纯度,高活性的蓝舌病毒。用透射电镜和凝胶过滤层析检测纯化产物病毒的结构完整性和纯度;组织培养技术检测产物的生物学活性并计算纯化得率。结果表明,纯化后的病毒悬液通过凝胶过滤层析仅出现一个紫外吸收峰,其余的未见明显的吸收峰,仅表现为靠近基线的波动;将纯化前后的病毒悬液用磷钨酸负染后直接透射电镜观察,可见到完整的病毒粒子及其干净的背景;在相同条件下,纯化前的BTV-HbC3对Vero细胞的TCID50是10-6.6/ml,纯化后的病毒对Vero细胞的TCID50是10-5.7/ml;选取一定稀释度的复孔计数空斑,依据空斑计算公式求得不同稀释度下纯化前后病毒的滴度,通过比较纯化前后的病毒滴度计算该纯化方法的纯化得率,在10-3,10-4,10-5这三个稀释度下,所计算纯化得率分别为69.6%,70.8%,50.4%。 经蓝舌病毒处理过的细胞(7402细胞,Hep-3B细胞)在普通光学显微镜下即可看到明显的形态改变。细胞在接种病毒24 hr后开始收缩变圆,间隔变大,细胞轮廓增强,胞内有粗大折光颗粒;36hr后细胞逐渐脱落,漂浮,直至破碎死亡。用MTT染色方法检测蓝舌病毒对这两株肝癌细胞株的抑制活性。在10°稀释度的蓝舌病毒作用下测得这两株细胞的抑制率分别为:51.45%和77.69%。 通过PI染色检测经蓝舌病毒处理后不同时间的细胞凋亡情况,其中感染病毒后48hr的7402,Hep-3B细胞的凋亡率分别为20.1%,33.0%。通过Hoechst33258染色后进行共聚焦显微镜观察,结果在这两株细胞中均观察到典型的凋亡细胞,主要表现为凋亡细胞出现核碎裂、边聚,碎裂的细胞核呈致密浓染的颗粒状或块状荧光,与此同时,完整核膜清晰可见。
其他文献
汉儿庄铁矿是唐山地区县办小铁矿,本文介绍它因地制宜,通过矿、村联营采矿实现采选配套,通过工农共建共管治理尾矿,以及科学治矿的经验。
Hanzhuang Iron Ore is a small ir
摘 要: 探究高效课堂是每个教师都十分重视的问题,新课程教学时间十分宝贵。要提高教学的整体质量,必须提高课堂教学效率。 关键词: 物理教学 学习兴趣 人际关系 教学行为 探究教学的高效,是每个教师教学工作的主要目标,应试教学中的教学观与教学行为已经不符合现代教育发展的需要,它影响学生的全面发展,因此,在新时期的教学中,教师要树立全新的教学观念,必须将学生的全面发展作为教学活动的根本目标,离开学
一、2017 年工作和成效rn2017 年,在自治区党委、人民政府坚强领导下,在国家体育总局特殊重视下,在全区体育系统努力拼搏下,各项工作取得扎实成效.rn(一)重点工作落实有力rn
摘 要: 本文分析了化学难学的主要原因:化学教学内容抽象,本身点多面广;化学概念和理论具有较强的概念性和抽象性,分析了原因产生的主客观条件,并就学好化学的策略谈了体会:培养学习化学的浓厚兴趣,重视对化学学科的预习,重视化学基本概念的理解和基本原理的掌握,善于质疑并乐于探究,勤能补拙,勤于思考并善于总结等。 关键词: 化学学习 学习策略 培养兴趣 重视预习 善于质疑 化学基础知识点多而杂,很多化
为提高安技人员的管理水平,公司安全处与教培处于1991年10月7~14日在铜录山矿举办了矿井通风系统测定培训班。参加培训的有公司下属各矿山的安技人员和专职通风管理人员。培
目的:观察增龄过程中胸腺细胞、胸腺上皮细胞和巨噬细胞的形态学改变以及CD、CD、CD阳性细胞数目的变化情况,从而判断CD/CD比值与鼠龄的关系;根据不同月龄IL-6产生情况判断IL
目的: 乙型肝炎病毒(HBV)是一种嗜肝病毒属、双股环状DNA,是导致乙型病毒性肝炎的病原体。乙型病毒性肝炎作为一种传染性极强的疾病,在中国乃至全球仍旧是一个严重的全球性公
摘 要: 文章分析了化学实验教学存在的问题,论述了制约实验教学有效开展的因素,提出了实验教学有效开展的改进建议。 关键词: 化学实验教学 有效开展 制约因素 改进建议 教育部2011年颁布的《义务教育化学课程标准》指出:“化学是一门以实验为基础学科,在教学中创设以实验为主的科学探究活动,有助于激发学生对科学的兴趣,引导学生的观察、实验和交流中学习化学知识,提高学生的科学探究能力。”化学实验是化
丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)基因组编码两个包膜(Envelope,E)糖蛋白:E1和E2。E1和E2都是高度N-糖基化的糖蛋白。病毒糖蛋白上的糖链是机体细胞识别、结合的靶分子,并且具有
【舆情回放】近日,北京市发布消息,所有中小学校不得与房地产商合作办学。不仅为持续高烧的学区房降温,也厘清商业化的房地产行业与公益化的教育事业之间的关系。【网络舆情