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随着人们生活水平的提高,水果已经成为几乎每一个人的必备食物,同时水果也是最常见的致敏食物。而桃又会常常引起过敏反应。现在已经鉴定桃过敏原有5大类。其中脂质转移蛋白Pru p3是引起中国人食桃过敏的最主要过敏原。桃过敏患者反映不同桃(油桃)品种引发过敏的程度不同。为明确不同桃品种间Pru p3蛋白含量的差异,在研究应用双单抗夹心ELISA方法,对中国100多份桃核心种质资源进行果实Pru p3含量测定。主要结果如下: 1.针对桃果皮中存在大量果胶等杂质,影响后面蛋白纯化等实验,对桃蛋白粗提物用微量浓盐酸(每50ml桃总蛋白提取液加20μl浓盐酸)处理,经SDS-PAGE检测,浓盐酸处理样品后目的蛋白Pru p3没有沉淀,再用间接ELISA检测Pru p3免疫活性,结果显示,少量浓盐酸处理后纯化得到的Pru p3的免疫活性良好。实验所用过敏原标准品nPru p3来源于‘湖景蜜露’果皮。 2.研究发现大部分桃品种随着桃成熟,其Pru p3含量也在升高,少量品种随着桃成熟,其Pru p3含量在降低;同一桃品种,连续两年测定结果显示,不同年份(2014年和2015年),桃中的Pru p3含量变化明显。差异幅度在0.29-11.62倍。比如‘锦绣黄桃’的Pru p3含量2015是2014年的11.62倍。 3.将所测桃品种分为4类:野生砧木品种、油桃品种、地方品种和培育品种。根据不同品种检测结果,果实Pru p3含量变异范围在6.43-311.81μg/g,低于20μg/g的品种可作为低过敏类型。野生桃品种Pru p3含量最低为17.30μg/g,其次是油桃品种为35.78μg/g,地方品种(81.34μg/g)和培育品种(93.83μg/g) Pru p3含量差异不明显,远高于油桃品种和野生桃品种。 4.分别定量不同桃品种中果皮,果肉和整果中Pru p3含量,结果表明,Prup3主要累积在果皮中,果肉中Pru p3含量远远低于果皮中Pru p3含量。