特异性环状RNA在多囊卵巢综合征患者卵丘颗粒细胞中的表达及其潜在意义

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songyc198610712
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目的:探究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者卵丘颗粒细胞中特异性环状RNA(circRNAs)的表达水平及其在PCOS发病机制中的潜在意义。方法:收集同期于青岛大学附属烟台毓璜顶医院生殖医学科第一次接受标准长方案促排卵行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)的12名女性(6例PCOS患者和6例正常对照者)的卵丘颗粒细胞,全RNA提取后进行circRNA微阵列芯片检测。根据生物信息学分析结果,筛选6组circRNAs,另取接受IVF-ET的50名女性(25名PCOS患者和25名正常对照者)的卵丘颗粒细胞进行独立队列研究,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证6组circRNAs微阵列结果。采用Spearman秩相关和ROC曲线分析特异性表达的circRNAs与患者临床特征的相关性及其对于PCOS的鉴别效能。通过KEGG Pathway、TargetScan和Cytoscape等生物信息学方法构建竞争性内源性RNA(ceRNAs)作用网络图,初步分析差异表达的circRNAs可能的作用方式及途径。结果:CircRNA微阵列芯片共筛选出286个差异表达的环状RNA(167个上调,119个下调),KEGG Pathway分析显示,差异表达的circRNA与细胞周期、卵母细胞减数分裂和孕酮介导的卵母细胞成熟等过程密切相关。经进一步qRT-PCR验证,PCOS组hsacirc0043533(p<0.05)和hsacirc0043532(p<0.01)的表达水平显著高于非PCOS组,hsacirc0097636(p<0.01)的表达水平明显低于非PCOS组,而hsacirc0118530(p=0.4157),hsacirc0020491(p=0.1536)和hsacirc0074576(p=0.4440)的表达在两组间无差异。Spearman秩相关分析显示,PCOS组患者血清睾酮(T)水平与hsacirc0043533和hsacirc0097636的表达呈现正相关性。ROC曲线分析表明,联合hsacirc0097636和T的表达对于PCOS有最大的鉴别效能(曲线下面积AUC=0.893),显著优于单独应用hsacirc0043533(AUC=0.709)、hsacirc0097636(AUC=0.738)或hsacirc0043532(AUC=0.718)。Cytoscape网络图提示,差异表达的circRNAs可能通过调节miR-30c,miR-125b和miR-132来影响DGKI,PCYT1B,FOXO3和CCNB1等基因的表达,进而导致PCOS卵丘颗粒细胞出现多种功能障碍。结论:在接受IVF-ET的女性中,与非PCOS患者相比,PCOS患者卵丘颗粒细胞中hsacirc0043533和hsacirc0043532显著高表达,hsacirc0097636的表达明显下降;对这些差异表达的circRNAs进行更为深入的研究,或许能为我们明确PCOS的发病机制和开展有效的治疗干预提供更加广阔的思路。
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