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恶性肿瘤已超过心脑血管疾病而跃居为人类致死疾病的首位，且随着环境污染、不良生活方式、人口老龄化等问题的日趋加剧，肿瘤的发病率和死亡率仍呈逐年增加的趋势，而现有的传统疗法因其局限性致使肿瘤患者的治愈率未有明显提高，因此，如何提高肿瘤防治水平和寻找治疗肿瘤的新方法已成为科学家和临床医学家亟待解决的问题。随着细胞信号传导途径的阐明，越来越多可用作治疗肿瘤的药靶被发现，其中I<,A>型磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)因与肿瘤发生发展关系密切而备受瞩目。新近发现其55kDa的调节亚基p55γ N末端的24个氨基酸(N24)可直接参与调控Rb蛋白，从而对细胞周期产生调节作用，故将Rb作为靶点，探讨N24对肿瘤的治疗作用可能具有重要的研究价值。
为此，本课题以携带N24基因的重组腺病毒(Ad-N24-GFP)为研究对象，观察其对人肺腺癌细胞SPCA-1体内外生物学行为的影响和对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响，以期为肿瘤基因治疗提供新的理论依据。
方法：①经293细胞扩增、CsCl密度梯度离心纯化制取病毒液，并对其各项质量指标进行监测。②SPCA-1细胞感染.Ad-N24-GFP后，MTT法检测生长抑制率，流式细胞术检测细胞周期、细胞增殖和周期蛋白cyclin D1的变化，Western Blot检测Rb表达的变化，初步探讨Ad-N24-GFP对SPCA-1细胞的作用效果。③通过观察Ad-N24-GFP感染的SPCA-1细胞在裸鼠体内的成瘤情况和Ad-N24-GFP对裸鼠SPCA-1移植瘤的治疗作用来具体评价Ad-N24-GFP在动物体内的抗肿瘤效应。④建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成模型，观察N24基因重组腺病毒对新生血管的影响。
结果：①成功纯化了Ad-GFP和Ad-N24-GFP，测得病毒各项指标均符合要求，且无复制型病毒的污染。②Ad-N24-GFP转染SPCA-1细胞后，可显著抑制其增殖，G<,0>/G<,1>期比例显著增高，BrdU掺入量明显减少，Cyclin D1含量明显增高，磷酸化Rb水平下调。③Ad-N24-GFP能显著降低SPCA-1细胞的体内致瘤性和抑制SPCA-1移植瘤的生长。④Ad-N24-GFP对CAM血管生成具有较强抑制作用，且对微血管作用强于大血管。
结论：P13K p55γ N末端的24个氨基酸的超表达，可显著抑制SPCA-1细胞增殖和CAM血管的新生，为进一步开展肿瘤基因治疗的体外及临床研究提供了实验依据。