论文部分内容阅读
[背景与目的]粘附分子整合素β1受体介导的对基质的粘附作用，不仅可使造血细胞固定在合适的骨髓微环境中，以接受各种细胞因子等因素的调节，还可直接抑制细胞增殖。已有研究发现CML骨髓Ph+祖细胞β1受体的粘附及增殖抑制功能存在缺陷。这一缺陷是导致CML Ph+细胞大量增殖及粘附能力下降的重要原因之一。CML进展至急变期后Ph+祖细胞表现出更强的异常增殖能力，并且对骨髓基质的粘附力进一步下降，导致外周血中出现大量原始细胞。由于整合素β1受体介导的粘附作用对造血细胞的正常增殖分化及释放入血有重要作用，故研究整合素β1受体介导的粘附功能在CML急变过程中所起的作用将对了解CML急变机制有重要意义。本实验选择整合素信号通路中的两个关键分子即胞膜β1受体(CD29)及胞浆内局部粘附激酶FAK为对象，观察CML急变期与慢性期CD34+细胞中这两个分子含量的变化对CML急变过程的影响。 另有研究发现IFN可通过恢复CML细胞β1受体胞内粘附信号通路的缺陷来改善β1受体介导的对基质的粘附及对细胞的增殖抑制功能。这可能是临床上IFN能够有效治疗CML的原因之一。本实验拟通过观察IFN处理前后β1受体信号通路中的关键分子FAK含量的变化来探讨IFN治疗CML的机制。 [方法]（1）以CD34、CD29及FAK单抗荧光标记骨髓单个核细胞。应用流式细胞仪检测正常组，CML慢性期组及CML急变组CD34+细胞的胞膜表面CD29及胞浆FAK表达量。（2）将正常对照组及CML慢性期组骨髓单个核细胞分别经IFN处理及非处理培养48小时后提取总蛋白。应用Western Blotting方法检测IFN处理及非处理的正常组与CML慢性期组FAK含量变化。 [结果]（1）CML慢性期骨髓CD34+细胞表面CD29的表达与对照组无显著差异，而胞内FAK含量则下降。（2）CML急变期骨髓CD34+细胞表面CD29的表达较慢性期明显升高，而胞内FAK含量则较慢性期进一步下降。（3）IFN处理前后正常骨髓单个核细胞FAK的含量无明显差异。（4）IFN处理后 CML骨髓单个核细胞 FAK的含量较未处理明显上升。 【结论】门)CML慢性期骨髓造血细胞表面pl受体表达量无明显异常，而胞内 FAK含量有所下降，这～结果支持了m。61受体粘附缺阳存在于胞内的理论。（2）本实验首次发现删L进展至急变期骨髓造血细胞表面fil受体表达量明显上升，这可能是急变期CML干／组细胞的粘附机制调节进一步紊乱的结果。（3）本实验首次发现CML进展至急变期，骨髓造血细胞内FAK含量较慢性期又进一步下降，这可能是造成删L原始细胞大喧入血的原因之一。（4）本实验首次发现IFN－a处理川提高CML慢性期骨髓单个核细胞中 FAK含量，从而提示 IFN a可能通过，队复 FAK含量来改香pl受体介导的粘附信号通路的缺陷。