集胞藻6803中slr0815的功能分析

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蓝藻是一类能够进行放氧光合作用的原核生物,也是研究光合作用的模式生物之一。众所周知,在蓝藻细胞的类囊体膜上存在着四类介导光合电子传递的膜蛋白复合体,分别是:光系统I(PSI)、光系统II(PSII)、细胞色素b6f(Cytb6f)和NADPH脱氢酶(NDH-1)。这些膜蛋白复合体分别参与了线性电子传递途径和围绕PSI的循环电子传递途径,是蓝藻细胞完成电能向化学能的转换所必需。因此,这些光合电子传递体对蓝藻细胞的生长,特别是在胁迫条件(例如高光)下的存活扮演着极其重要的生理角色。目前,寻找这些光合电子传递体的新组份或调控因子已成为光合领域研究的重点与热点之一。因此,本论文首先就集胞藻6803(Synechocystis sp. strain PCC6803)转座子插入突变体库进行高光筛选,我们成功地筛选到三株高光敏感的突变株。进一步研究表明,这三个高光敏感突变株NDH-CET的活性均受损,并且转座子插入到同一个基因——slr0815。为确定高光条件下的生长表型是否由此基因专一突变引起的,我们构建并成功地获得了Δslr0815的互补株。通过生理功能的检测,我们肯定了slr0815基因的缺失专一地导致了高光敏感的生长表型。进一步研究发现Slr0815位于类囊体膜上,它的缺失不影响PSI和PSII的活性,也不影响NDH-1复合体的表达与组装,但重大减弱了线性电子传递、cytf基因的表达水平和ndhL基因的转录水平(肯定了生物信息学的预测)。这些结果暗示着Slr0815参与了线性和循环电子的传递。因此,这一蛋白在蓝藻光合电子传递中扮演着极其重要的生理角色。
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