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目的：研究短发夹RNA (short-hairpin RNA, shRNA)干扰抑制趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type4, CXCR4)的表达,对人化疗耐受性腺样囊性癌细胞NACC-DDP生物学特性的影响及其可能机制。方法：(1)以腺样囊性癌细胞系NACC为亲本细胞,顺铂为诱导药物,采用大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法获取耐药细胞。Western Blot法比较亲本和耐药细胞间耐药蛋白P-gp的表达差异。(2)构建靶向CXCR4基因的shRNA真核表达载体质粒,经脂质体转染体外培养的NACC-DDP细胞系,PCR、Western Blot法检测质粒对CXCR4表达的干扰效果。(3)MTT法、克隆形成实验、Transwell法分别检测非转染组,空载体组、阴性质粒对照组、shCXCR4组细胞的增殖；克隆形成及侵袭能力。(4) qPCR、Western blot法分别检测各组细胞CD44、CD133mRNA及蛋白表达情况。(5)将转染后各组细胞分别接种于裸鼠右侧腮腺,建立腮腺原位移植瘤模型。隔日观察肿瘤体积,绘制生长曲线。接种35天处死动物,取瘤体称重,免疫组织化学法检测CXCR4、CD44、CD133、VEGF的阳性表达,CD34染色计算微血管密度。Western blot法检测移植瘤CXCR4、CD44、 CD133表达情况。结果：经2个月耐药处理,建立了在0.5μg/ml顺铂作用下生长良好的细胞系NACC-DDP,该细胞耐药蛋白P-gp表达较亲本细胞升高。转染后,shCXCR4组细胞CXCR4、CD44mRNA及蛋白表达,较其他各组显著降低,CD133在各组表达量均较少,且组间无显著性差异。shCXCR4组细胞增殖较其他各组明显受到抑制,其他各组间细胞增殖情况无差异,与未转染组比24h、48h、72h抑制率分别为38.21%、39.40%、37.84%。shCXCR4组细胞克隆能力明显低于其他各组,克隆抑制率为54.5%。体外侵袭能力显示shCXCR4组跨膜细胞数(73.6±8.82)较其他各组(非转染组168.6±12.05,空载体组173.0±17.76,阴性质粒对照组174.6±8.68)明显减少。shCXCR4组裸鼠移植瘤瘤体体积(554.72±71.32)明显较未转染组(901.96±55.55),空载体组(871.41±46.40),阴性质粒组(835.38±76.33)小,P<0.01。免疫组化法检测移植瘤CXCR4、CD44、VEGF在shCXCR4组表达量明显低于其他各组,微血管密度减低、血管面积减少,CD133表达量较少,且组间无显著差异。移植瘤CXCR4、CD44蛋白表达量在shCXCR4组明显降低,CD133在各组表达量均较低,且组间无显著性差异。结论：靶向CXCR4的短发卡RNA可有效抑制NACC-DDP细胞系CXCR4的表达,抑制细胞增殖、克隆、侵袭、成瘤能力,并可通过下调VEGF表达的方式抑制裸鼠移植瘤的微血管生成,从而起到抑瘤效果,提示抑制CXCR4的表达可成为耐药腺样囊性癌靶向治疗的一个位点。