β-内啡肽介导RVLM吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究

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目的探究头端延髓腹外侧区(RVLM)吗啡预处理(MPC)对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤和血流动力学的影响以及该过程中RVLM内c-Fos蛋白表达水平和外周β-内啡肽(β-EP)含量的变化。方法成年雄性SD大鼠72只,体重280-320g,RVLM置管模型建立成功后随机分成4组(n=18),分别为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IPC+IR组)和RVLM吗啡预处理组(MPC+IR组)。缺血再灌注模型采用冠状动脉左前降支结扎30 min再灌注120 min,缺血预处理方法为心肌缺血5 min再灌注5 min,重复处理3次。Sham组、IR组和IPC+IR组预先通过导管5 min内匀速注射0.9%生理盐水0.2μl,间隔5 min后再次输注,重复3次,共输注0.6μl。之后IR组进行缺血再灌注;IPC+IR组在I/R前进行IPC;MPC+IR组在I/R前核团注射吗啡(5 min内匀速注射吗啡0.2 ul,停5 min,共3次,共输注0.6μl,吗啡按1 ug/kg用生理盐水配制成0.6 ul)。观察心电图,于再灌注30 min内记录室性心律失常[室性早搏(PVCs)及室速/室颤(VT/VF)]发生次数。心脏标本进行氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,测量左心室(LV)、右心室(RV)、梗死区(IS)、缺血危险区(AAR)体积并计算IS/AAR比值。Western blot法检测RVLM核团c-Fos蛋白表达,ELISA法与免疫组化染色法分别定量和定性检测T2-5脊髓与左心室肌中β-EP的表达。结果与Sham组比较,IR组的IS体积、IS/AAR增高(P<0.01),PVCs、VT/VF发生次数增加(P<0.01),c-Fos表达水平增高(P<0.01),脊髓和心肌中β-EP表达水平增高(P<0.01);与IR组比较,IPC+IR组和MPC+IR组的IS体积、IS/AAR降低(P<0.05),PVCs、VT/VF发生次数减少(P<0.01),c-Fos表达水平降低(P<0.01),心肌和脊髓中β-EP表达水平增高(P<0.01)。结论:RVLM吗啡预处理可以一定程度上减轻大鼠心肌I/R损伤,该作用可能与降低I/R后RVLM核团内c-Fos表达水平有关,β-内啡肽可能作为递质介导了RVLM吗啡预处理产生的心肌保护效应。
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