论文部分内容阅读
【目的】(1)检测肝癌组织中肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达,分析其表达水平与肝癌临床病理特征及有无门脉癌栓的相关性。(2)体外观察巨噬细胞与不同转移潜能的人肝癌细胞株MHCC97H和SMMC7721共培养前后侵袭能力变化情况,并利用RT-PCR方法检测共培养前后肝癌细胞株MMP-9mRNA表达水平差异,探讨二者在肝癌侵袭转移中作用及其可能相关分子机制。【方法】(1)选取72例肝细胞癌手术切除标本,按有无门脉癌栓分为2组,采用免疫组织化学染色方法,检测肝癌组织中TAMs和MMP-9的表达水平,分别探讨其与肝癌临床病理特征及门脉癌栓的关系并检测其相关性;(2)采用Transwell小室共培养体系检测不同转移潜能的人肝癌细胞株MHCC97H和SMMC7721与巨噬细胞共培养前后侵袭能力变化情况,并测定肝癌细胞株MMP-9mRNA共培养前后表达水平,探讨巨噬细胞影响肝癌侵袭转移的可能相关分子机制。【结果】(1)免疫组织化学染色结果显示:TAMs主要分布于癌内和癌周组织,MMP-9则主要表达于胞浆中;在所检测的72例肝癌组织标本中,二者在肝癌患者门脉癌栓组中的表达阳性率(68.6%和82.6%)均高于无门脉癌栓组(37.8%和43.2%),差异有统计学意义(P <0.05);Spearman rank相关分析提示MMP-9表达与TAMs计数呈正相关(r=0.474, P <0.01)。(2)巨噬细胞与不同转移潜能的人肝癌细胞株MHCC97H和SMMC7721共培养24小时后肝癌细胞株侵袭能力显著提高,差异具有统计学意义(P<0.001);随着转移潜能的逐步增加,相应肝癌细胞株共培养前后侵袭能力增加幅度逐渐加大:SMMC7721<MHCC97-H;RT-PCR结果显示其MMP-9mRNA表达增加幅度亦呈升高趋势:SMMC7721<MHCC97-H;提示不同转移潜能肝癌细胞株与巨噬细胞共培养前后可能通过上调MMP-9mRNA表达而促进侵袭。【结论】(1)TAMs浸润与MMP-9在肝癌中表达水平与肝癌血管侵犯尤其门脉癌栓密切相关,且二者表达水平呈正相关;提示TAMs可能通过促进肝癌细胞上调MMP-9表达介导肝癌侵袭转移尤其是门脉癌栓形成。(2)MHCC97H和SMMC-7721与巨噬细胞共培养后其侵袭能力较共培养前均显著增强,其分子机制可能与上调肝癌细胞MMP-9mRNA表达有关。从而验证巨噬细胞可能通过增加肝癌细胞的MMP-9表达量促进肝癌侵袭转移,从而为探索治疗肝癌新思路和分子靶向治疗提供新靶点。