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由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)是发生于羊、牛、猪等偶蹄动物中的烈性、急性和高度传染性疾病。此病给全球畜牧业造成非常大的损失。天然免疫反应是机体抵御病毒感染的第一道防线,起到清除病原体,保护机体的作用。FMDV感染宿主会引起宿主的天然免疫反应,同时FMDV也会利用宿主自身的蛋白拮抗宿主免疫反应而促进自身的复制。DEAD-box RNA解旋酶(DDX56)主要参与RNA的代谢过程,研究表明其可以促进西尼罗病毒(WNV)和人类免疫缺陷病毒(HIV)的复制,但其中的机制并不清楚。课题组前期研究发现人源DDX56可以减少仙台病毒(Sendai virus,SeV)引起的IFN-β的生成,并且发现猪源DDX56可以促进FMDV的复制,表明这两者之间有一定的联系。首先为了阐明人源DDX56阻止IFN-β生成的分子机制,过表达实验表明人源DDX56可以明显阻止IFN-β通路的激活和IFNB1基因的转录。而将人源DDX56沉默或缺失后,SeV引起的IFN-β的表达水平明显升高,水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)的复制水平明显降低。进一步研究发现病毒感染可以促使人源DDX56与IRF3互作。过表达人源DDX56可以明显减少IRF3的入核。而人源DDX56沉默和敲除后,病毒引起的IRF3的入核增加。另外我们也发现过表达人源DDX56可以阻止IRF3和IPO5的相互作用,而沉默或缺失人源DDX56后,IRF3与IPO5的相互作用明显增强。这些结果表明人源DDX56通过破坏IRF3与IPO5的相互作用来减少IRF3的入核。为了确定人源DDX56的功能位点,我们构建了人源DDX56的突变体,发现人源DDX56的D166位点是其发挥抑制天然免疫反应的关键功能位点。为了探究猪源DDX56在FMDV复制中的作用,我们检测了猪源DDX56对FMDV复制的影响。结果表明过表达猪源DDX56可以明显促进FMDV的复制,而沉默猪源DDX56则使FMDV的复制减少。我们发现猪源DDX56可以阻止病毒引起的IFN-β的活化,并且与IRF3有相互作用。为了进一步探究猪源DDX56促进FMDV复制的分子机制,我们通过报告基因筛选试验发现猪源DDX56可以协同FMDV病毒蛋白VP0,VP1,VP2和3A阻止IFN-β的活化。并且通过免疫共沉淀试验发现猪源DDX56可以与FMDV病毒蛋白VP0,VP1,VP2和3A有相互作用。进一步试验证明,猪源DDX56可以协同FMDV 3A减少磷酸化IRF3的水平,同时猪源DDX56的D166位点是其促进FMDV复制的关键位点。总之,我们发现人源DDX56在病毒感染细胞后能与IRF3相互作用,破坏了IRF3与IPO5复合体的形成而抑制IRF3的入核,从而负调控病毒引起的IFN-β的生成。在随后的研究中,我们发现在FMDV感染期间,猪源DDX56可以协同FMDV 3A减少IRF3的磷酸化而减少IFN-β的生成,最终促进FMDV的复制。我们的研究阐述了病毒诱导的IFN-β产生的部分调控机制,同时阐述了FMDV拮抗宿主天然免疫系统的新机制,深化了我们对宿主天然免疫和FMDV致病机制的认识。