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莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)属于苯酚胺类β-肾上腺激动剂,具有增强脂肪分解代谢,促进蛋白质合成,显著增加酮体瘦肉率,提高饲料转化率的作用。目前美国、加拿大等国家均允许RAC作为饲料添加剂使用,但是在欧盟和中国,RAC被列为禁用药物。因此,建立有效的RAC残留检测方法对于监控动物源性食品中RAC残留是非常必要的。
本研究建立了猪肾脏、肺脏和脂肪中RAC残留的高效液相色谱(HPLC)检测方法。药物用丙酮提取,β-葡萄糖苷酶作用后,经萃取净化,用HPLC-FLD检测。猪肾脏、肺脏和脂肪中RAC的检测限(LOD)均为l ng儋,定量限(LOQ)均为2 ng/g。肾脏添加浓度2-50 ng/g时,平均回收率为73.1%~95.5%,变异系数(CV)为3.8%~4.5%;肺脏和脂肪添加浓度2-20 ng/g时,肺脏平均回收率为82.2%~85.3%,CV为3.3‰~6.1%;脂肪的平均回收率为73.3%~78.8%,CV为3.0%~6.7%。
本研究在国内外首次建立了猪毛发中RAC残留的HPLC检测方法。毛发碱消解后,经乙腈提取和MCX柱净化,用HPL-FLD检测,LOD为5ng/g,LOQ为10 ng/g。毛发添加浓度为10ng/g、20 ng/g和40 ng/g时,平均回收率为78.7%~82.3%,变异系数为2.4%-3.1%。
45头健康猪饲喂28 d含18 mg/kg盐酸RAC的饲料。在给药7、14 d和停药0、1、2、3、7、9、14 d分别屠宰5头猪,取肾脏、肺脏、脂肪和毛发样品进行检测。结果显示,毛发中RAC的残留量最高,且消除最缓慢,停药O d残留量达到最高,为706.91~1144.48 ng/g,停药14 d残留量仍可达151.53~260.88 ng/g,肾脏和肺脏中残留量其次,在给药14 d时残留量最高,达到200ng/g左右,肾脏在停药O d时残留量降至53.28~117.97 ng/g,在停药14 d时残留量基本低于LOD;肺脏在停药0 d时残留量降至76.68~157.87 ng/g,停药14 d时残留量接近LOQ;脂肪中药物残留量最低,在给药14 d的残留量为2.52~7.35。ng/g,停药O d时部分动物脂肪的残留量低于2 ng/g,在停药1 d时均低于LOD以下。
研究了毛发与肾脏、肺脏、肝脏残留的相关性,初步探讨了残留预测模型。毛发与。肾脏RAC残留量拟合公式为C<,K>=6.42x 10<-7>CH<2.749>,R2=0.901,毛发与肺脏RAC残留量拟合公式为C<,LU>=0.001CH<1.845>,R<2>=0.765,毛发与肝脏RAC残留量拟合公式为C<,LI>=5.16×10<-7>CH<.657>,R<2>=0.846。用以上拟合公式得到的组织残留预测值与实测值差异不显著(P>0.05)。三组残留预测模型中由其以毛发.肾脏拟合度较好,更符合实际情况。