我国习见栽培的地生兰花,皆为兰属(Cymbidium Sw.),多年生常绿草本植物;兰属约四十种,主要分布亚洲热带和亚热带地区,少数分布大洋洲和非洲。我国有20种及其变种,是本属的分布中心。兰花是我国的传统名花,是著名的珍贵盆花,因此,对国兰进行组织培养、遗传转化的研究具有重要的意义。本试验以春兰(Cymbidium goeringii Rchb.f.)为试材,系统地研究了离体培养中各种影响因子对类原球茎和芽的增殖、生长、生根以及长期培养后生长势恢复的影响;同时,对农杆菌介导的春兰转基因进行了初步研究。主要研究结果如下:(1)在春兰类原球茎途径的研究过程中,利用春兰根状茎的茎段及嫩芽,在添加了5.0mg/L NAA的MS基本培养基上,成功诱导获得了绿色的质地优良的类原球茎;并进一步探索了类原球茎增殖的最佳生长调节剂浓度为BA 0.1mg/L;在对不同有机添加物的对比试验中发现,酵母添加物和蛋白胨对类原球茎鲜重的增加和增殖效果均较佳,其中以1.0g/L的蛋白胨最佳。(2)在芽途径的组织培养研究中,优化NAA浓度(5.0mg/L),诱导丛生芽的产生,提高了芽的增殖率;同时发现,影响生长势减弱的春兰生根的关键因素是芽的高度;当然,适宜浓度的蔗糖(20g/L)也是春兰生根所必需的。(3)通过对类原球茎和生长势减弱材料芽增殖的研究发现,鲜重增加率/增殖率(F/P值)是衡量类原球茎或芽正常生长与否的一个重要指标。类原球茎的F/P值≧0.6时,类原球茎生长健壮,色泽深绿;而F/P值＜0.6时,类原球茎生长偏弱,色泽黄绿,部分黄化。而芽增殖的适宜的F/P值在1.12左右。F/P值的提出使春兰生长势的强弱实现量化。(4)初步建立了一套适合于春兰的遗传转化体系,转化材料通过了GUS染色和PCR检测,说明gus基因已经整合到春兰的基因组中。