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目的: 卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤，就诊时70%的病例已属晚期。卵巢癌之所以防治困难，与发生发展机制不明确有很大关系，所以研究探讨卵巢癌的发生发展情况，对于其诊断治疗及预后均至关重要。目前认为，细胞凋亡与肿瘤血管生成在卵巢癌的发生发展过程中起关键作用。恶性肿瘤的细胞凋亡，血管生成受许多因素调节，其中包括内源性，外源性因素以及近年来发现的大量的凋亡，血管生成相关因子如p53、p21、bcl-2、c-myc、血管生成素、血管内皮生长因子（VEGF）、微血管密度(MVD)等。目前调控肿瘤细胞凋亡，血管生成的基因表型的克隆与鉴定已成为研究肿瘤发生发展的热点。凋亡抑制因子survivin与缺氧诱导因子HIF-1α（Hypoxia-inducible Factor 1α）是近年来新发现的研究恶性肿瘤的热点基因蛋白。本研究应用间接免疫荧光流式细胞技术定量检测凋亡抑制因子survivin和缺氧诱导因子HIF-1α在卵巢癌、良性卵巢肿瘤，正常卵巢组织中的定量表达情况以及与卵巢癌的临床分期、分化程度、病理类型的关系，目的是通过研究凋亡抑制因子与缺氧诱导因子在卵巢癌的发生、发展过程中的作用，来进一步探讨细胞凋亡和血管生成在恶性肿瘤中的作用和相互关系，并为卵巢癌的早期诊<WP=4>断、治疗和预后的评价提供理论依据。材料与方法：（1）研究对象：卵巢肿瘤组织标本81例，年龄17-60岁，平均年龄46.5±8.5岁，其中卵巢癌患者49例（上皮性癌28例，生殖细胞肿瘤14例，性索间质肿瘤7例）。按照1987年FIGO临床病例理分期标准进行分期，其中Ⅰ期11例，Ⅱ期17例，Ⅲ期19例，Ⅳ期2例；卵巢良性肿瘤患者32例，（卵泡膜细胞瘤9例，囊性畸胎瘤7例，粘液性囊腺瘤6例，浆液性囊腺瘤10例）；正常卵巢组织13例作为对照，年龄在30-55岁之间，平均年龄44±8.2岁。（2）试剂：一抗为1:100浓度稀释的鼠抗人survivin单克隆抗体(美国NeoMarkers公司产品)；1:100浓度稀释的鼠抗人HIF-1α(aa530-826)单克隆抗体(美国NeoMarkers公司产品)；1:100浓度稀释的鼠抗人VEGF(amino acids 1-140)单克隆抗体(美国SANTA CRUZ公司产品) 。二抗为1:100浓度稀释的羊抗鼠FITC-IgG抗体(美国Jackson Immuno Research公司产品)，。（3）方法：应用流式细胞技术和间接免疫荧光的方法。分两部分进行，第一部分为survivin、HIF-1α、VEGF的检测：术中切取卵巢组织后，制成蜡块，常规病理切片，HE染色，由有经验的病理医师进行诊断核实。切取40-50微米厚的切片，然后经过脱蜡、水化、制成单细胞悬液、离心、免疫荧光染色等步骤后上机检测和在免疫荧光显微镜下观察。第二部分为细胞凋亡（DNA含量）检测，术中切取的卵巢组织于70%乙醇固定，然后制成单细胞悬液，在进行细胞DNA的染色，上机检测。并计算荧光指数(FI)和细胞凋亡率(AP),进行统计学处理。结果：（1）survivin、HIF-1α及细胞凋亡率水平在不同卵巢组织中的表达结果：survivin在卵巢癌组织中的高表达（97%，48/49），在卵巢良性肿瘤组织中低表达（25%，8/32），在卵巢正常组织中的不表达（0/13）(P<0.01)。而且survivin在卵巢癌组织的FI值明显高<WP=5>于卵巢良性肿瘤组织和卵巢正常组织，P＜0.01。HIF-1α在卵巢癌组织中表达率为100%（49/49），明显高于卵巢良性肿瘤组织37%（12/32），而在卵巢正常组织中不表达（0/13），P＜0.01，同样，卵巢癌组织的HIF-1α的表达量FI值与良性卵巢肿瘤组织和卵巢正常组织相比差异显著，P＜0.01。三种卵巢组织的凋亡细胞率的差别有统计显著性，P＜0.01，卵巢正常组织中的细胞凋亡率最高，其次为卵巢良性肿瘤组织，卵巢癌组织的最低。（2）survivin、HIF-1α在不同临床分期、分化程度、病理组织类型的卵巢癌组织中的表达结果：HIF-1α在晚期（Ⅲ、Ⅳ期）卵巢癌中的表达量明显高于早期（Ⅰ、Ⅱ期）卵巢癌组织，P＜0.05；HIF-1α的表达与卵巢癌组织的分化程度和病理组织类型无关。survivin在宫内膜样癌中的表达量明显高于恶性畸胎瘤、无性细胞瘤，P＜0.05，而与浆液性腺癌、粘液性腺癌无明显差异，P＞0.05。Survivin的表达从卵巢癌Ⅰ期到Ⅳ期呈升高的趋势，但无统计学显著性。Survivin的表达与卵巢癌组织的分化程度无关。（3）在卵巢癌组织中survivin的蛋白表达量与细胞凋亡率水平呈负相关,r=-0.479，p<0.01；HIF-1α的表达量与VEGF的表达量呈正相关，r=0.753，P＜0.01；survivin与HIF-1α的蛋白表达量呈正相关，r=0.734，P＜0.01。结论：卵巢癌组织中的survivin和HIF-1α蛋白的定量表达均明显高于良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织，而且卵巢癌组织的survivin与癌组织的凋亡细胞率呈负相关，HIF-1α与血管生长因子VEGF的表达量呈正相关，表明了survivin和HIF-1α与卵巢肿瘤的细胞凋亡和血管生成关系密切，而且在卵巢肿瘤的发生与发展机制中发挥重要作用，提示survivin和HIF-1α是具有潜在价值的肿瘤分子标志物，有望成为卵巢肿瘤基因治疗的新靶点。