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目的:本研究基于“肾脑相济”理论的电针疗法对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠海马组织内细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及线粒体自噬相关蛋白Bnip3的影响,从线粒体自噬的角度探讨“肾脑相济”电针疗法对“髓海空虚”AD的影响,探讨其作用机制,为临床治疗AD提供指导和实验依据。材料与方法:选取雄性同源抗快速老化小鼠(SAMR1)6只及快速老化小鼠(SAMP8)18只,将SAMP8小鼠随机分成模型组,西药组及电针组,每组6只。单笼饲养。1.行为学指标检测:采用Morris水迷宫检测小鼠学习能力以及记忆能力,它分为定位航行实验和空间探索实验。定位航行实验是用来检测逃避潜伏期、游泳总路程,用来评价小鼠学习能力;空间探索实验是用来检测在目标象限游泳时间占总时间的百分比,用来评价小鼠记忆能力。2.电针治疗:对照组、模型组正常喂养,不接受治疗。西药组小鼠选用美金刚灌胃,每日灌胃1次。电针组根据“肾脑相济”理论,选取“百会”、“肾俞”、“太溪”每日电针1次,持续15分钟。治疗结束后通过行为学指标的变化评价电针对AD模型小鼠的治疗效果。3.指标观察:行为学指标检测结束后,麻醉处死所有小鼠取材,小鼠大脑组织石蜡切片,采用尼氏染色和免疫组化,观察小鼠海马结构和神经细胞形态变化;分离小鼠海马组织,采用Western Blot检测海马组织中LC3-Ⅱ和Bnip3的含量。结果:1.经过8w的电针和药物治疗后,Morris水迷宫定位航行实验的结果:随着训练天数的增加,各组实验小鼠逃避潜伏期均日渐减少,对照组与模型组相比较,模型组动物平台搜索效率下降,逃避潜伏期延长,游泳路程增加,差异有统计学意义。西药组、电针与模型组相比较,西药组,电针组动物平台搜索效率高于模型组,逃避潜伏期明显缩短,游泳路程比模型组明显减少,差异有统计学意义。2.经过8w的电针和药物治疗后,Morris水迷宫空间探索实验的结果:对照组、西药组、电针组目标象限游泳时间占总时间的百分比增加,差异具有统计学意义。3.经过8w的电针和药物治疗后,尼氏染色检测结果:空白组海马CA1区神经元的椎体细胞排列紧凑,细胞层数多为4-5层且神经元胞体大,胞质色浅而均匀,细胞核大而圆,内含有丰富的尼氏体,颜色较深。模型组神经元椎体细胞在海马CA1区排列紊乱,数量混乱不清,层数杂乱不堪,旦神经元胞体体积缩小,形态缺失或不完整,尼氏小体溶解混乱。西药组与模型组相比,神经元细胞排列较为整齐,边缘略有松散,数量稍有减少,细胞形态尚可,胞体形态大小正常,内含丰富的尼氏小体。电针组与模型组相比,神经元细胞较有序,数量略有减少,细胞形态稍有皱缩,胞体形态大小正常,内含丰富的尼氏小体,胞质染色均匀,细胞核大而圆。4.经过8w的电针和药物治疗后,免疫组化检测结果:与对照组相比,模型组大鼠海马CA1区细胞的细胞质染色较深,呈棕褐色,细胞数量减少,细胞排列疏松不齐,间隙增大,甚至出现细胞层中断,甚至有些细胞的细胞核消失,结构不完整。与模型组相比,西药组,电针组大鼠海马CA1区细胞的细胞质染色较浅,细胞层细胞数量多,排列整齐,神经元结构完整,胞质染色均匀,清晰。5.经过8w的电针和药物治疗后,Western Blot结果:与模型组相比,对照组海马内LC3-Ⅱ及Bnip3蛋白含量低于模型组组(P<0.05);与模型组相比,西药组、电针组海马内LC3-Ⅱ及Bnip3蛋白含量低于模型组(P<0.05),差异有统计学意义,西药组与电针组相比无统计学意义。结论:1.“肾脑相济”理论指导下,电针疗法可以有效改善AD模型小鼠学习记忆能力;2.“肾脑相济”理论指导下,电针疗法有助于线粒体功能的正常运行,从而降低线粒体自噬的发生,使细胞形态趋于正常;3.“肾脑相济”理论指导下,电针疗法可以下调LC3-Ⅱ、Bnip3蛋白含量的表达,降低细胞自噬及线粒体自噬的发生。