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神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是一种典型的神经营养因子,已被证实具有促进细胞增殖分化及诱导轴突生长等作用。但NGF存在半衰期短,稳定性差且易失活等问题,为使NGF能够缓慢释放达到促进神经再生的目的,本文用聚乳酸(Polylactic acid,PLA)和氧化石墨烯(Graphene oxide,GO)通过电纺技术构建了PLA/GO/NGF静电纺丝缓释给药系统。NGF在京尼平交联作用下包封于牛血清白蛋白(Bovine albumin,BSA)中,该NGF/BSA颗粒能保证NGF活性并达到缓释效果。以乳液电纺法将NGF/BSA颗粒包裹在PLA/GO纤维膜内,得到的PLA/GO/NGF静电纺丝缓释给药系统具有较好的NGF缓释性能,有望更好地促进周围神经修复与再生。首先,进行了PLA/GO电纺纤维膜的制备与表征。正交实验筛选出最佳纺丝条件为温度:25℃,湿度:50%,溶液浓度:12%,电压:15 kV,速率:0.04 mm/min,接收距离:15 cm。利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察纤维膜的表面形貌,傅里叶变换红外光谱和拉曼光谱分析其组成和结构;采用四点探针法测试PLA/GO电纺纤维膜的导电性能;比重法测定其孔隙率;分析其pH值变化和失重率变化考察其降解性能。结果表明,GO可较好地被剥离并成功掺入PLA纤维内且分散均一;掺入适量的GO能够提高PLA/GO电纺纤维膜的导电性能;随GO掺入量的增加,PLA/GO电纺纤维膜的孔隙率明显变大;当掺入GO质量分数为1.0%时,其力学性能有所改善且断裂伸长率达到125.4%±1.46%,断裂强度较纯的PLA而言明显提高;同时GO的掺入使纤维膜的降解速率减低。其次,对PLA/GO/NGF进行载药性能研究。以改进的乳液电纺法包裹NGF/BSA颗粒,制备出PLA/GO/NGF给药系统,采用酶联免疫吸附法对NGF体外释放性能进行研究。结果显示:该给药系统中NGF的载入量为(49.8±1.12)ng,其累计释放时间可以达到35天以上且累积释放率约为85.2%,可实现NGF的持续缓慢释放。PLA/GO/NGF缓释系统有望为周围神经修复提供良好的“微环境”,促进神经再生。最后,将雪旺细胞(RSC96)和骨髓间充质干细胞(BMMSCs)与PLA/GO/NGF静电纺丝缓释给药系统共培养,CCK-8法考察其细胞毒性,免疫荧光双染色图和SEM图评价了细胞在材料表面的粘附和增殖情况。采用免疫荧光染色法并结合肾上腺嗜络细胞瘤细胞(PC12细胞)的分化率,评价纤维膜浸提液对NGF活性的影响,比较PLA/GO/NGF缓释给药系统在电刺激作用下对细胞生长的影响。结果表明:该系统的细胞毒性较低,对RSC96细胞和BMMSCs细胞的粘附和生长有促进作用,其浸提液与PC12细胞共培养在第1、7、14和21天均可促进细胞轴突分化,说明该系统在外加电刺激作用下,可以较长时间地维持NGF的活性且具有一定电刺激作用。以上表明,PLA/GO/NGF静电纺丝缓释给药系统具有NGF缓释性能和较好的电刺激作用,这在神经组织工程中具有潜在的应用前景。