吸入不同时间异氟烷对发育期大鼠海马组织的wnt3a及β-catenin表达的影响

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研究背景:随着手术和麻醉学的不断发展,越来越多的孕妇及婴幼儿的疾病可以通过手术来治疗,这使得正处于重要发育阶段(怀孕的最后3个月至出生后第二年)的中枢神经系统不可避免的暴露于麻醉药物的刺激之下。发育期中枢神经系统内递质和受体的作用机制纷繁复杂,尤其在以突触可塑性发育为主的高峰发育期内。若此时出现内、外环境因素的改变,则会直接影响到神经细胞的增殖、移行、分化,突触的形成,回路重塑及联想学习能力的建立,进而影响其后乃至终身的神经、行为能力和学习记忆功能。异氟烷和七氟烷是常用的吸入性麻醉气体,其神经毒性尤其是对神经发育期的神经毒性作用,一向是临床麻醉医师关注的重点。然而,关于吸入麻醉药对发育期大脑作用的相关作用机制,目前仍未明确。如何在确保麻醉完善的同时,将麻醉药物对发育期中枢神经系统的影响减至最小,是一直困扰着麻醉科医生的难题,同时也是近年来麻醉界的研究热点。研究目的:本次研究旨在观察不同时间的2%异氟烷处理,对7日龄大鼠的海马组织中wnt3a及β-catenin的基因表达和蛋白表达的影响,初步探讨异氟烷处理对发育期大鼠海马神经组织相关作用的可能机制以及与作用时间的相关关系。研究方法:将7日龄的SD雄性大鼠32只,按随机表法随机分成4组,分别为吸入空气的对照组(A组),2%异氟烷2小时处理组(B组),2%异氟烷4小时处理组(C组),以及2%异氟烷6小时处理组(D组),每组幼鼠处理中均无缺氧及C02蓄积发生。建模结束6小时后,再将上述各组幼鼠随机分为RT-PCR实验组(A1,B1,C1,D1)和western blot实验组(A2,B2,C2,D2),分别取海马组织检测wnt3a和β-catenin的基因表达和蛋白表达。研究结果:经2%浓度的异氟烷处理后,发育期SD大鼠海马组织中的wnt3a mRNA的表达:与对照组相比,只有C1组有统计学差异(P<0.05),其它各组wnt3a mRNA表达虽有上调,但没有统计学意义;经2%异氟烷处理后,发育期SD大鼠海马组织中wnt3a蛋白的表达:与对照组比,B2组、C2组和D2组明显上调(P<0.05),其中D2组显著上调(P<0.01)。经2%异氟烷处理后的发育期SD大鼠海马组织中的β-catenin mRNA的表达:与对照组相比,B1和D1组有统计学差异(P<0.05),Cl组表达虽有上调,但无统计学意义;经2%异氟烷处理后,发育期SD大鼠海马组织中的β-catenin蛋白的表达:与对照组比,B2组、C2组和D2组明显上调(P<0.05),其中D2组显著上调(P<0.01)。结论:通过观察经过不同时间的2%异氟烷处理的7日龄SD大鼠海马组织的wnt3a和β-catenin的基因表达及蛋白表达,我们发现随着2%异氟烷处理时间的延长会导致上述两种蛋白在海马组织中表达上调,并且6小时组上调尤为明显,据此表明高浓度的异氟烷处理对发育期大鼠海马组织的神经作用与时间具有正相关性。这为我们对于探究异氟烷对于处在发育期海马组织的神经相关作用提出了新的思路,wnt3a和β-catenin蛋白表达同步上调为我们研究吸入高浓度异氟烷是否通过经典Wnt信号通路影响发育期海马组织的神经相关作用给出了方向。
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