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[目的]探讨长链非编码RNA H19(lnc RNA H19)在胃癌细胞系和胃癌干细胞中表达的差异性,及其对肿瘤干细胞特性及生物功能的影响,为研究胃癌的特异性靶向治疗奠定基础。[方法]采用实时荧光定量PCR方法(q RT-PCR)检测lnc RNA H19在胃癌组织中的表达水平,通过无血清悬浮培养法从MGC-803胃癌细胞系中分离干细胞样亚群,同时检测lnc RNA H19在MGC-803胃癌细胞系和瘤球细胞中的表达水平,从而分析lnc RNA H19与肿瘤干细胞的潜在联系,在体外利用慢病毒包装法将lnc RNA H19干扰质粒(si H19)和对照质粒(con-H19)分别转染入胃癌细胞,通过嘌呤霉素筛选稳定细胞系,Real-time PCR检测H19 m RNA的下调效果,瘤球形成实验和细胞克隆形成实验检测细胞的自我更新与增殖能力的改变,蛋白质印迹法(Western blot)、流式细胞术(FCM)检测干细胞相关因子CD24、CD44的表达变化,以此观察lnc RNA H19对胃癌干细胞生物学特性的影响,从而探讨lnc RNA H19在胃癌的发生、发展中的生物学作用。[结果]q RT-PCR结果显示H19在胃癌组织中的表达量较相应的正常胃上皮组织显著升高(P<0.05);无血清悬浮培养的MGC-803瘤球细胞较其贴壁细胞显著高表达H19 m RNA(P<0.01);通过q RT-PCR验证了细胞的慢病毒包装效果,结果显示干扰组(si H19)的H19表达量显著减少(P<0.001);基因干扰H19的表达后,MGC-803细胞干扰组较对照组在无血清培养基条件下的成瘤率明显降低(P<0.05),平板克隆形成实验与琼脂克隆形成实验结果也显示干扰组的克隆形成能力与增殖能力较对照组下调(P<0.01);荧光实时定量PCR检测干细胞相关因子CD24、CD44在干扰组中表达下调(P<0.05);Western blot结果显示:用特异性si RNA干扰H19的表达后,胃癌细胞CD44蛋白表达水平减少;通过流式细胞技术检测后发现,下调MGC-803胃癌细胞的H19表达水平同时降低了CD24(+)CD44(+)的细胞百分比。[结论]胃癌组织较相应胃正常上皮组织中存在着H19的高表达,同时干细胞亚群中H19的表达高于胃癌组织。下调胃癌细胞的H19表达可以降低胃癌细胞的增殖力和克隆能力,同时降低成瘤能力及自我更新的干细胞特性。因此,本实验认为lnc RNA H19在胃癌干细胞特性方面的维持发挥着一定的作用,可能成为干预胃癌干细胞的一个潜在靶点。