血必净对大鼠重症急性胰腺炎治疗作用的实验研究

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目的:本研究通过检测重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis ,SAP)大鼠血清中白介素-6(IL-6)、内毒素(LPS)、一氧化氮(NO)、氧自由基的含量及胰腺组织病理学观察,研究血必净(Xue Bi jing)对大鼠SAP模型的治疗作用,为临床治疗提供理论依据。方法:SD大鼠54只,雌雄各半,体重250~300g(河北医科大学实验动物中心提供),编号904240,随机分为3组,其中A组为空白对照组(n=18),B组为模型组(n=18),C组为药物治疗组(n=18),各实验组又分2个亚组,即12h、24h亚组,各9只。本实验模型组采用经十二指肠乳头逆行胆胰管注射3.5%牛磺胆酸钠方法制备大鼠SAP模型;药物治疗组在制备SAP大鼠模型成功后腹腔给予血必净注射液(4ml/kg),每隔6小时后再给药一次;空白对照组开腹,轻翻动胰腺。对照组和模型组腹腔给予治疗组等剂量的生理盐水(4ml/kg)。按预定时间点处理大鼠。切取胰腺,观察胰腺大体标本,留取部分胰腺组织制备组织切片行HE染色,进行组织学观察及组织病理学评分;计算胰腺的湿/干重比;用纱布法计算腹腔积液重量;留取血清测定血清中淀粉酶、IL-6、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、NO、内毒素的含量。并且利用spss11.5对数据进行分析。结果:1胰腺组织观察:①大体标本:A组为正常胰腺组织,无充血水肿;B组胰腺重度水肿、苍白,灶状或大片状出血坏死灶;C组见胰腺肿胀,点状出血坏死。②光镜下见:A组胰腺小叶结构清晰,间质内未见炎症细胞及红细胞;B组胰腺小叶排列紊乱,腺泡结构消失,腺泡细胞萎缩、胞核溶解消失明显,小叶间充斥大量炎症细胞及红细胞;C组各时间点均见胰腺小叶间隔增宽,部分小叶内可见腺泡细胞坏死改变,间质内红细胞及炎症细胞散在分布。③胰腺湿/干重比测定结果:B组各时间点较A组同时间点值升高,其差异有显著性(P<0.05);C组12h、24h时间点较B组同时间点值降低,差异有显著性(P<0.05)。④胰腺组织病理学评分结果:B组随时间延长损伤程度加重,各时间点间差异有显著性(P<0.05),与A组相比在各时间点损伤程度均加重,差异有显著性(P<0.05);C组胰腺损伤组织病理学评分在各时间点与B组相比均降低,差异有显著性(P<0.05)。2腹腔积液:①A组未见腹水;B组腹腔内可见大量混浊血性腹水,大网膜、肠系膜可见皂化斑;C组,少量腹水,颜色较淡。②腹腔积液比较:B组各时间点腹腔积液重量随时间延长而增加,差异有显著性(P<0.05);C组各时间点较B组同时间点腹腔积液重量减少,差异有显著性(P<0.05)。3血清淀粉酶测定结果: B组各时间点血清淀粉酶值较A组有明显升高,差异有显著性(P<0.05),C组12h、24h时间点血清淀粉酶值较B组值降低,差异有显著性(P<0.05)。4内毒素测定结果: B组血清内毒素含量各时间点较A组均明显升高,差异有显著性(P<0.05);B组血清内毒素含量各时间点随时间延长而增加,差异有显著性(P<0.05);C组各时间点的内毒素含量较B组同时间点均降低,差异有显著性(P<0.05)。5 IL-6含量:B组血清IL-6含量各时间点较A组均升高,差异有显著性(P<0.05);B组血清中IL-6含量在各时间点随时间延长而增加,差异有显著性(P<0.05);C组血清IL-6各时间点的含量较B组同时间点均降低,差异有显著性(P<0.05)。6 NO的测定结果:B组血清NO含量各时间点较A组均升高,差异有显著性(P<0.05);B组血清NO含量各时间点随时间延长而增加,差异有显著性(P<0.05);C组血清NO各时间点含量较B组同时间点均降低,差异有显著性(P<0.05)。C组内12h、24h的NO含量无显著性差异(P>0.05)。7氧自由基的测定结果:①MDA含量:B组血清MDA含量各时间点较A组均升高,差异有显著性(P<0.05);B组血清MDA含量各时间点间随时间延长而升高,差异有显著性(P<0.05);C组血清MDA含量各时间点较B组同时间点降低,差异有显著性(P<0.05)。②SOD含量B组血清SOD含量各时间点较A组均降低,差异有显著性(P<0.05);B组血清SOD含量各时间点随时间延长而降低,差异有显著性(P<0.05);C组血清SOD含量各时间点较B组同时间点升高,差异有显著性(P<0.05)。结论:通过对大鼠重症胰腺炎的实验研究,证实重症急性胰腺炎可引起IL-6水平升高,中性粒细胞过度氧化应激,肠源性内毒血症。本实验结果表明,血必净可以拮抗内毒素,下调炎症反应,提高机体对氧自由基的清除能力,减轻胰腺组织损伤。
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