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目的:本实验探讨sMICA通过影响移植物中NK细胞表面NKG2D表达量、IFN-γ分泌水平影响异基因造血干细胞移植后cGVHD的发生。方法:1.NK细胞的纯化:采集健康志愿者外周血20ml,Rosettesep NK富集试剂盒分选NK细胞,采用检测分选前后细胞纯度变化。2.NKG2D表达水平和IFN-γ分泌水平检测:分选后NK细胞进行体外培养,观察培养前后细胞数量的变化。采用流式细胞术检测NK细胞与不同浓度sMICA蛋白共培养后NKG2D的表达水平。ELISA检测培养液中IFN-γ的含量。3.NK细胞杀伤功能检测:采用CCK8比色法,K562细胞为靶细胞,效靶比为10:1,与不同浓度sMICA蛋白共培养的NK细胞对K562细胞的杀伤作用。4.采集异基因造血干细胞移植患者移植后第100天外周血,采用ELISA检测血清中sMICA的含量。结果:1.NK细胞的纯度:分选前后分别为(13.2±2.1)%和(88.6±5.5)%。2.NK细胞表面NKG2D的表达率:sMICA 0、100 ng/ml NKG2D的表达率分别为(91.24±1.96)%、(80.11±2.21)%,差异有统计学意义(P<0.05)。3.各组培养液中IFN-γ的分泌水平:sMICA 0、0.5 ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml、100ng/ml浓度组IFN-γ的分泌水平分别为(134.74±23.30)pg/ml、(190.43±15.41)pg/ml、(215.91±14.54)pg/ml、(128.35±18.75)pg/ml、(95.09±15.67)pg/ml,sMICA 0.5 ng/ml、1 ng/ml浓度组上调NK细胞分泌IFN-γ水平,明显高于sMICA 0浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。SMICA 10 ng/ml、100 ng/ml浓度组下调NK细胞分泌IFN-γ水平,低于sMICA 0浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.NK细胞的杀伤活性:SMICA 0、100 ng/ml浓度组NK细胞的杀伤活性分别为(38.82±2.21)%、(12.71±1.48)%。SMICA 100 ng/ml浓度组明显低于sMICA 0浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。5.ELISA检测12例患者血清中sMICA的含量:6号患者sMICA的含量为386.08pg/ml,明显高于其他患者,6号患者是唯一有cGVHD的患者。结论:SMICA可以下调NK细胞表面NKG2D受体的表达,降低NK细胞的杀伤活性;对IFN-γ分泌水平的调节具有剂量依赖性,低剂量的sMICA(0.5 ng/ml和1 ng/ml)上调活化的NK细胞分泌IFN-γ水平,而高剂量的sMICA(10 ng/ml和100 ng/ml)降低活化的NK细胞分泌IFN-γ水平。外周血sMICA水平可作为cGVHD发生潜在的预测指标,成为潜在减弱cGVHD的免疫治疗的新靶点。