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目的:探讨PINK/parkin介导非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型大鼠肝细胞线粒体选择性自噬及其碎片降解机制的干预效应。方法:将SD大鼠80只适应性喂养一周后,随机分出10只作为8周空白组(第8周末处死)和10只作为12周空白组(第12周末处死)作为正常对照组,始终予以普通饲料喂养。剩余60只予以高脂饲料喂养建立大鼠模型,分别为8周模型组(第8周末处死),脂肝方低剂量组、脂肝方中剂量组、脂肝方高剂量组、西药组(立普妥灌胃)、第12周模型组各10只,上述五组大鼠喂养至12周末处死并采集血液标本、肝脏标本,采用全自动生物化学仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的水平;镜下观察肝细胞病理分型,透射电影观察线粒体自噬溶酶体结构,Western Bolt检测PINK/parkin信号通路下游的Mfn1、Mfn2、Opa1、LC3蛋白表达水平,免疫组化法检测PINK、parkin的表达。结果:1、高脂模型组血清ALT、AST、TG、TC较空白对照组明显升高(P<0.01),病理学提示模型组炎症细胞浸润、脂质沉积及肝细胞坏死程度比同期空白组严重,说明造模成功。2、电镜观察肝细胞线粒体及自噬体结构,发现正常组未见自噬体,模型组和西药组可见少量自噬体,中药组的自噬体明显增多,结构典型,包裹有线粒体碎片等其余细胞器,并且以中药高剂量组增多最为明显。3、12周模型组出现大量肝脂肪变、气球样变、小叶内炎症和肝脂质沉积等炎症反应现象,并且明显比8周模型组严重,而8周模型组则很少出现这些病理改变,提示8周到12周高脂饮食喂养确实诱导了大鼠肝组织病变从NAFLD向NASH的进展。4、Western Blot结果提示,模型组线粒体融合蛋白Mfn1和线粒体内膜的视神经萎缩蛋白Opa1表达水平较同期显著降低,自噬特异蛋白LC3表达降低(P均<0.01),Mfn2表达升高(P<0.01),表明其线粒体自噬水平降低,融合障碍;与12W模型组相比,药物干预后,线粒体融合蛋白Mfn1表达水平升高,视神经萎缩蛋白Opa1表达水平明显升高,自噬特异蛋白LC3表达水平升高(P均<0.05),Mfn2表达降低(P<0.05),表明药物干预可提高线粒体选择性自噬表达水平,减少线粒体细胞凋亡,其中以脂肝方高剂量组升高最为明显。5、免疫组化结果提示:PINK1在正常组中,阳性表达率较低,组织间隙正常;在模型组中,阳性表达率显著升高,染色呈棕黄色,组织间隙增大;经药物干预后,中药组的阳性表达率略高于正常组,组织间隙轻度增大,西药组的阳性表达率略高于中药组,组织间隙轻度增大。Parkin在正常组中,阳性表达率较高,染色呈棕黄色,组织间隙正常;在模型组中,阳性表达率显著下降,组织间隙增大;中药组的阳性表达率高于模型组,组织间隙轻度增大;西药组和中药组相比,阳性表达率降低,但仍高于模型组,组织间隙轻度增大。结论:高脂饮食可以诱导大鼠非酒精脂肪肝炎的形成,肝细胞炎症、线粒体损伤、自噬受限。脂肝方可明显改善NASH大鼠模型肝脏脂肪变性、脂质沉淀并且通过介导PINK/parkin通路及其下游的蛋白Mfn1、Mfn2、Opa1、Lc3的表达来减轻肝脏炎症反应,抑制肝细胞凋亡。实验证明脂肝方对减轻肝脏的炎症反应及抗凋亡有一定作用,并且有可能通过PINK/parkin通路介导线粒体选择性自噬机制实现的。