论文部分内容阅读
目的探讨鞘内注射右旋美托咪啶(Dex)能否抑制福尔马林致痛大鼠的疼痛效应以及对大鼠脊髓背角nNOS mRNA表达的影响。方法本实验包括两部分内容:(1)观察鞘内注射右旋美托咪啶对福尔马林疼痛大鼠行为学的影响。(2)采用Real Time PCR,检测鞘内注射右旋美托咪啶对大鼠脊髓背角nNOS mRNA表达的影响。成年雄性SD大鼠24只随机分为S组为假手术组(麻醉、消毒,不在脚底注射5%甲醛,麻醉前10 min鞘内注射生理盐水20μl );O组为手术对照组;D1组为Dex 5μg/kg组;D2组为Dex 10μg/kg组。在1.5%异氟烷麻醉下,O组、D1组和D2组在所有大鼠右后足底皮下注射5%甲醛40μl,D1组和D2组于术前10min鞘内注射右旋美托咪啶,S组和O组鞘内注射0.9%氯化钠溶液20微升。观察大鼠在I相(O-5min)和II相(15-50min)疼痛行为学变化(包括缩腿、舔足、咬足动作),并进行Dubuisson评分。注射福尔马林1小时后处死大鼠,打开椎板,暴露腰膨大部的脊髓,用手术刀片切下腰膨大部脊髓。将采集到的脊髓组织浸泡于非液氮型样品RNA保存液中,用Trizol法提取大鼠脊髓组织总RNA,并用Beckman核酸蛋白分析仪测提取的总RNA的浓度,将提取的总RNA逆转录成cDNA,4℃保存备用。采用Real Time荧光定量PCR方法检测脊髓背角L4-5nNOS mRNA表达情况。结果各组大鼠,在I相中的疼痛评分的差异无统计学意义(P>O.05);在II相中与O组相比,S、D1、D2组的大鼠疼痛评分均显著减少,差别有统计学意义(P<O.05),D2组的大鼠疼痛评分显著小于D1组,差别有统计学意义(P<O.05);O组nNOS mRNA的相对表达量均显著高于其他3组(P值均<0.05),D1组的nNOS mRNA的相对表达量均显著高于D2组和S组(P值均<0.05)。结论鞘内注射右旋美托咪啶对福尔马林致痛大鼠有明显镇痛作用,且随剂量增大而增强,其镇痛作用可能与其抑制脊髓背角nNOS mRNA的表达有关。