鸡球虫病是由寄生性原虫引起的，严重危害集约化养鸡业生产的最主要疫病之一。目前鸡球虫病的控制仍主要依赖药物，但严重的抗药性使球虫病的控制受到前所未有的挑战[1]，迫切需要新球虫药物面市。近年来，基于药靶有目的性地进行药物设计成为当今药物创制的主流方法，而明确靶蛋白的功能、以及通过X射线衍射解析药靶结构和作用机理是设计和合成新型药物的基础。沉默信息调节因子2（silent information regulator2，Sir2）在染色质沉默、代谢调节和抗原变异等生命活动中发挥重要作用，被认为是研制新型抗感染性药物的潜在药物靶标，迄今尚未有关于球虫Sir2的相关研究报道。研究选取对临床危害最为严重的柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella，E.tenella）为研究对象。应用生物信息学和比较基因组学技术注释获得了E.tenella的Sir2基因序列并设计引物，以E.tenella第二代裂殖子cDNA文库为模板， PCR扩增EtSir2ORF基因序列。构建pET43a-EtSir2重组表达载体，原核表达并纯化后进行酶动力学及抑制动力学分析。结果显示，EtSir2ORF全长909bp，编码一段全长302个氨基酸的胞浆蛋白。种间相似性为24%～58%，与刚地弓形虫和犬新孢子虫进化关系最为接近。EtSir2分子质量约为99ku，以可溶性蛋白形式表达。最佳反应条件下EtSir2对NAD+的Km=41.7μM，Vmax=0.07349mmol/min/mg，对Ac-peptide的Km=51.2μM，Vmax=0.1093mmol/min/mg。先导化合物：尼克酰胺（Nicotinamide，NAM）能够抑制EtSir2的活性，其IC50值为355μM。该研究结果为EtSir2作为抗球虫药物靶标，研制新型抗球虫药物提供了理论和实验基础。