[目的]探讨通在卵巢浆液性癌SKOV-3细胞株中过表达雌激素受体ERα/β,检测雌激素结合不同受体对Plexin-B1的影响。[方法]1、通过慢病毒转染的方法,把过表达ER α及ER β的载体转染到SKO V-3细胞株中,构建高表达ER α/β的SKOV-3细胞株。将培养好的细胞分为对照组(空白组)、过表达ER a组(ER α)、过表达ERβ组(ER β)。2、慢病毒感染SKOV-3细胞24小时,RT-PCR及Western Blotting检测过表达ER a组(ER α)、过表达ER β组(ER β)两组细胞感染前后SKOV-3细胞中ERα、ERβ表达情况。3、利用MTT实验检测将17β-雌二醇(10-6mol/L)及雌激素受体拮抗剂ICI180,782 (100 nM)单独及共同处理SKOV-3细胞24h后,检测对照组、过表达ER α组、过表达ER β组三组SKOV-3各组细胞活性的影响。4、慢病毒感染细胞24h后,利用Western Blotting及RT-PCR分别检测对照组、ER α组、ER β组中Plexin-B1总蛋白、RNA表达情况。5、用17 β-雌二醇(10-6mol/L)刺激各组细胞24h后,RT-PCR及West ern Blotting检测对照组、过表达ERα组、过表达ER β组三组细胞中Plexin-B1的mRNA及蛋白的表达水平；利用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。6、雌激素受体拮抗剂ICI 182,780 (100nM)预处理各组细胞6小时后再添加17 β-雌二醇(10-6mol/L)处理24小时,RT-PCR及Western B1 otting检测三组细胞内Plexin-B1 mRNA及蛋白表达水平；利用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。[结果]1、慢病毒转染24小时后荧光显微镜下观察感染效率,绿色荧光占视野70%以上证明感染成功,细胞存活率大于95%。2、转染后的SKOV-3细胞传代,培养24小时后进行Western Blotting和RT-PCI进行检测,结果ER α及ER β在转染后的SKOV-3细胞稳定高表达。3、17 β-雌二醇(10-6mol/L)刺激对照组、ERα组、ERβ组三组细胞24小时后,检测各组细胞内Plexin-B1蛋白及mRNA的表达,研究发现：(1)过表达ER a组中Plexin-B1蛋白及mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)；(2)过表达ER a组细胞迁移力明显高于对照组(P<0.05)；(3)过表达ERβ组中Plexin-B1蛋白及mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05)；(4)过表达ER β组细胞迁移力明显低于对照组(P<0.05)。4、雌激素拮抗剂ICI 182,780 (10OnM)先预处理细胞6小时后,再加入17 β-雌二醇(10-6mol/L)处理24小时。实验显示,利用Western Blotting及RT-PCR检测雌激素拮抗剂ICI180,782(100nM)先预处理细胞6小时后,再加入10-6mol/L17β-雌二醇处理24后SKOV-3细胞。(1)Plexin-B1蛋白及mRNA,三组对比差异无统计学意义(P>0.05);(2) SKOV-3细胞迁移力,三组无对比统计学差异。[结论]1、通过慢病毒介导ERα及ERβ过表达载体后感染SKOV-3细胞的方法,我们成功建立了高表达ER a及ER β的卵巢癌细胞株,为后续的研究奠定了基础。2、慢病毒介导ER α及ER β过表达载体感染SKOV-3细胞后,进行细胞培养及传代,ERα及ERβ可以在转染的SKOV-3细胞中稳定过表达。3、细胞内过表达ER a,雌激素能够促进细胞内Plexin-B1 mRNA及蛋白的表达,增加细胞迁移力。4、细胞内过表达ER β,雌激素能够抑制细胞内Plexin-B1 mRNA及蛋白的表达,抑制细胞迁移力。5、雌激素受体拮抗剂能够抑制雌激素对Plexin-B1的调控作用,证明雌激素对Plexin-B1的差异性调控是由不同的雌激素受体介导的。