枸杞中谷胱甘肽的含量测定研究

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本文从以下四章进行了详细的探讨:第一章绪论综述了谷胱甘肽的性质及生物学功能,并指出了研究谷胱甘肽的重要性,提出了本文的选题思想和研究内容。第二章利用5,5’-二硫硝基苯甲酸衍生化反应UV-Vis分光光度法和质谱分析法测定枸杞中谷胱甘肽利用衍生化试剂和植物材料同步破壁提取的样品处理方法,采用电喷雾质谱法和分光光度法对枸杞中还原型谷胱甘肽(GSH)进行定性、定量分析。质谱、UV-Vis吸收光谱测定结果表明:枸杞样品提取过程中GSH受破壁后胞外化学环境的影响导致氧化变性,故对提取液直接测定GSH含量得不到完整的含量信息。利用5,5’-二硫硝基苯甲酸(DTNB)衍生化试剂同步提取,因生成了稳定的GSH的衍生化产物避免了GSH氧化变性导致的GSH分析信息丢失。对本处理方法得到的枸杞提取液,用UV-Vis分光光度法测定了GSH含量,发现枸杞中含有丰富的GSH,其含量达6.56-7.37mg/g(干品),是目前为止植物样品中GSH含量最高的物种。本研究对药用植物胞内活性物质的准确分析提供了方法学上的重要的尝试,并通过测定首次发现枸杞中富含GSH。第三章邻苯二甲醛衍生化荧光分光光度法测定枸杞中GSH的研究利用电喷雾质谱法和紫外-可见分光光度法研究了邻苯二甲醛(OPA)和还原型谷胱甘肽(GSH)荧光衍生化反应,发现GSH和OPA在pH=8时生成两种不同结构的衍生化产物。其中与GSH的巯基和氨基与醛基直接缩合产物发出强烈的荧光发射且其荧光发射强度与GSH浓度呈良好的线性关系。利用荧光分光光度法分别采用标准曲线法和标准加入法测定枸杞提取液中的GSH含量,发现枸杞中含有迄今植物样品中GSH测定中最高的含量。本研究在前任工作基础上对荧光分光光度法测定GSH的方法学和衍生化反应机理研究上都做了进一步深入的探讨并首次测定枸杞中的GSH含量。通过测定发现药用植物枸杞是一种富含GSH的植物。该研究对GSH在枸杞生物活性及其药用价值中的评价和枸杞在防病治病中的应用都有实际意义。第四章循环伏安法研究Cu2+与谷胱甘肽的配位作用及分析应用通过Cu2+与(GSH)的配位作用,在过量Cu2+溶液中,利用循环伏安法测定剩余铜的阳极溶出峰的方法,间接测定了GSH的含量。实验表明,铜的氧化峰电流随溶液中GSH浓度的增加呈线性降低。用该方法测定7次的相对标准偏差(RSD)为0.5132%,检测限达5.6×10-7mol·L-1。利用该方法测定针剂中的GSH含量,并与光度法测定结果相比较,两者结果基本吻合。本研究提供了一种简便、可靠、快速测定基体成分不复杂样品中GSH含量的分析方法。
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