论文部分内容阅读
p16基因是一种重要的肿瘤抑制基因，通过直接抑制CDK4／6调节细胞增殖周期而抑制肿瘤细胞的生长。在鼻咽癌(NPC)中，p16基因无论是在NPC细胞系还是在人体肿瘤中均存在着高频率的失活，因此为明确p16基因在NPC中的作用及其对放射敏感性的影响，我们采用脂质体介导的基因转染方法将野生型p16基因、空载体转入该基因突变的人鼻咽癌细胞系CNE-2细胞中，同时设置不加任何质粒的CNE-2细胞作为对照，研究了p16基因对CNE-2细胞的增殖、凋亡、恶性表型及放射敏感性的影响，结果如下： 1·转染后用G418 400mg／ml筛选二周，100mg／ml维持直致形成G418抗性克隆出现，局部消化传代培养，经免疫组化检测证实转入p16基因的细胞有p16蛋白表达，表明p16基因转染成功并有效地表达。 2·导入p16基因使人鼻咽癌细胞系CNE-2细胞生长速度明显减慢，FCM检测显示细胞周期主要阻滞在G1期，S期细胞明显减少。 3·应用荧光染色(Hoechst33342)和Tunel检测法，均表明导入p16基因的CNE-2细胞的凋亡明显增加。 4·通过软琼脂集落形成实验证实导入p16基因的CNE-2细胞集落形成能力