【摘 要】
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研究背景及目的:免疫性血小板减少性紫癜（Immune thrombocytopenic purpura,ITP）是一种常见的获得性自身免疫性疾病,以血小板减少和皮肤黏膜出血为特征,是儿童时期最常见的出血性疾病之一。其发病机制复杂,目前普遍认为体液免疫紊乱、细胞免疫的异常、巨噬细胞成熟障碍等参与了该病的发生发展。E3泛素连接酶HUWE1在肿瘤疾病的生物学作用已有广泛报道,既可以发挥原癌基因的作用,又
【基金项目】
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2017年国家自然科学基金（项目号:81770115）《E3泛素连接酶HUWE1在免疫性血小板减少性紫癜Treg/Th17免疫失衡中的作用及机制研》；
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研究背景及目的:免疫性血小板减少性紫癜（Immune thrombocytopenic purpura,ITP）是一种常见的获得性自身免疫性疾病,以血小板减少和皮肤黏膜出血为特征,是儿童时期最常见的出血性疾病之一。其发病机制复杂,目前普遍认为体液免疫紊乱、细胞免疫的异常、巨噬细胞成熟障碍等参与了该病的发生发展。E3泛素连接酶HUWE1在肿瘤疾病的生物学作用已有广泛报道,既可以发挥原癌基因的作用,又可以发挥抑癌基因的作用,但在自身免疫性疾病的中研究中鲜有报道。近年来有研究发现部分E3泛素连接酶在某些自身免疫性疾病中的发生发展中发挥着重要作用,但是E3泛素连接酶是否在ITP中的有异常表达及其相关作用机制尚不明确,本课题将在临床水平检测ITP患者外周血CD4+T细胞中E3泛素连接酶HUWE1的表达情况,初步探讨E3泛素连接酶HUWE1的作用及可能机制。研究方法:采用qRT-PCR、Western blot检测ITP组和健康对照组外周血CD4+T细胞中HUWE1的表达;全自动血细胞分析仪检测ITP患者外周血血小板数量;流式细胞仪检测ITP患者外周血CD4+T细胞中Treg细胞比例,探讨HUWE1及与ITP患者血小板计数、Treg细胞比例的相关性;ITP患者外周血CD4+T细胞分为两组:shRNA-HUWE1转染组、shRNA转染组（阴性对照）,分别收集两组体外培养的CD4+T细胞,应用流式细胞仪、qRT-PCR、Western blot分别检测两组CD4+T细胞中Treg细胞比例和Foxp3的表达,ELISA测定血清中IL-10水平;对ITP患者Treg细胞行shRNA-HUWE1或shRNA感染,与效应T细胞培养,流式细胞仪检测效应T细胞的增殖情况。结果:ITP患者的外周血CD4+T细胞中HUWE1高表达,并与血小板计数呈负相关;HUWE1敲除后将会Treg细胞比例增加并促进Treg细胞对效应细胞的增殖抑制作用。结论:1.HUWE1参与了 ITP的发生发展。2.HUWE1可能通过调控Treg细胞的分化和功能而介导ITP的发生发展。
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