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背景动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是冠心病的主要病理基础。糖尿病是冠心病的独立危险因素,可加速动脉粥样硬化的发生和发展。目前认为糖尿病可通过高糖刺激氧化应激和炎症反应加速动脉粥样硬化的形成,但其具体的分子机制尚不明确,NF-κB是调节动脉粥样硬化病理过程的关键信号分子,Pin1可通过激活NF-kB p65在高糖诱导的血管损伤过程中发挥重要作用。白藜芦醇(Resveratrol,Res)是一种存在于葡萄、虎杖等植物中的非黄酮类多酚化合物,具有抗炎、抗氧化等作用。目前Res对糖尿病动脉粥样硬化的作用研究很少,尤其是分子机制并不明确。本课题采用体外细胞和体内动物相结合的实验模型,研究Res是否对糖尿病动脉粥样硬化有保护作用,并探索其作用机制是否与Pin1/NF-κB信号途径介导的氧化应激和炎症反应有关。第一部分白藜芦醇对糖尿病ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响目的:观察Res对糖尿病ApoE-/-小鼠胸主动脉动脉粥样硬化斑块和氧化应激、炎症反应及Pin1/NF-κB p65信号通路的影响。方法:本研究采用ApoE-/-小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,100mg/kg)建立糖尿病动脉硬化模型。油红O染色测胸主动脉内膜脂质沉积;Q-PCR法测Pin1、NADPH gp91、NF-κB p65 mRNA 表达水平;免疫印迹(Western blot)和免疫组化法测Pin1、NADPH gp91、NF-κB p65蛋白表达;化学酶法测MDA、ROS水平;ELISA法检测炎症因子IL-6、IL-10、TNFα水平。结果:1)Res及Pin1抑制剂可减少糖尿病小鼠胸主动脉内膜斑块面积,并改善胸主动脉舒张功能及收缩功能(P<0.05);2)Res及Pin1抑制剂可显著降低血清与胸主动脉中 MDA、ROS 及 IL-6、IL-10、TNFα 水平(P<0.05);3)Res 及 Pin1抑制剂均能下调糖尿病小鼠胸主动脉Pin1、NADPHgp91及NF-κBp65mRNA及蛋白表达,增加SOD活性(P<0.05)。结论:Res可改善糖尿病小鼠胸动脉粥样硬化,其机制可能与抑制Pin1/NF-κB p65信号通路介导的氧化应激及炎症反应有关。第二部分白藜芦醇对高糖诱导的ApoE-/-小鼠主动脉内皮细胞损伤的作用及Pin1机制目的:观察Res对高糖诱导的内皮细胞氧化应激和炎症反应的影响,探讨其抗内皮细胞损伤的Pin1/NF-κB p65信号机制。方法:采用25 mmol/L葡萄糖诱导小鼠主动脉内皮细胞损伤模型;流式细胞仪检测 ROS 水平;ELISA 法测 IL6、IL10、TNFα 水平;Q-PCR 和 Western blot 测NADPHgp91、Pin1、NF-κBp65 的表达水平。结果:1)Res,Pin1抑制剂及敲低Pin1可降低高糖诱导的细胞ROS及炎症因子IL-6、IL-10、TNFa 水平,下调 Pin1、NADPH gp91 的表达水平及抑制 NF-κB p65的核移位(P<0.05);2)过表达Pin1可提升高糖诱导的内皮细胞ROS、IL-6、IL-10、TNFα水平(P<0.05),促进NF-κBp65核移位,对抗Res降低高糖诱导细胞ROS和IL-6、IL-10、TNFα水平的作用及抑制NF-κB p65核移位的效应(P<0.05)。结论:Res可能通过调节Pin1/NF-κB p65信号通路抑制高糖诱导的内皮细胞氧化损伤及炎症反应。